HCC特异性结合的scFv-AP融合蛋白的构建与表达
HCC특이성결합적scFv-AP융합단백적구건여표체
  • 万方数据
    细胞与分子免疫学杂志 세포여분자면역학잡지

    2005年 6期 717-718,722 ,共3页

    程欣%黄永建%黄宇%朱慧芬%余冰%唐珍洁%李文涵%沈关心

    정흔%황영건%황우%주혜분%여빙%당진길%리문함%침관심

    单链抗体%碱性磷酸酶%融合蛋白%诱导表达 單鏈抗體%堿性燐痠酶%融閤蛋白%誘導錶達
    단련항체%감성린산매%융합단백%유도표체
    目的: 构建与肝癌细胞特异性结合的单链抗体-AP融合蛋白,并诱导表达.方法: 提取从大型人源噬菌体抗体库中筛选的含有与HCC特异性结合的scFv-10基因的质粒,用Sfi I、 Not I分别酶切, 连接至经同样双酶切后的原核分泌型表达载体pDAP2上, 转化和筛选后, 阳性细菌经IPTG诱导表达, 细胞ELISA鉴定融合蛋白活性.结果: 重组质粒经PCR扩增, Eco 91Ⅰ单酶切及Eco 91Ⅰ/Not I双酶切鉴定, 证明scFv-10基因已插入到原核分泌型表达载体pDAP2上.表达产物的定位分析表明融合蛋白主要分泌性表达到周质腔,细胞ELISA证明表达产物有与HCC结合的活性.结论: 成功地构建并表达了与HCC特异性结合的单链抗体-AP融合蛋白,为其应用奠定了基础.
    목적: 구건여간암세포특이성결합적단련항체-AP융합단백,병유도표체.방법: 제취종대형인원서균체항체고중사선적함유여HCC특이성결합적scFv-10기인적질립,용Sfi I、 Not I분별매절, 련접지경동양쌍매절후적원핵분비형표체재체pDAP2상, 전화화사선후, 양성세균경IPTG유도표체, 세포ELISA감정융합단백활성.결과: 중조질립경PCR확증, Eco 91Ⅰ단매절급Eco 91Ⅰ/Not I쌍매절감정, 증명scFv-10기인이삽입도원핵분비형표체재체pDAP2상.표체산물적정위분석표명융합단백주요분비성표체도주질강,세포ELISA증명표체산물유여HCC결합적활성.결론: 성공지구건병표체료여HCC특이성결합적단련항체-AP융합단백,위기응용전정료기출.
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