科技导报
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과기도보
SCIENCE & TECHNOLOGY REVIEW
2007年
3期
28-33
,共6页
王二耀%代相鹏%焦丽红%周琪%王柳
王二耀%代相鵬%焦麗紅%週琪%王柳
왕이요%대상붕%초려홍%주기%왕류
小鼠%核移植%卵母细胞%老化
小鼠%覈移植%卵母細胞%老化
소서%핵이식%란모세포%노화
就小鼠卵母细胞的卵龄对克隆胚的体外发育能力的影响进行了检测,以确定最佳的取卵时间,以及取卵后进行核移植操作的可耐受的时间.采用PMSG和hCG超排B6D2F1雌鼠.在体内老化实验中,分别于注射hCG后13,15,17,20 h取卵用于核移植操作;在体外老化实验中,所有的卵均于注射hCG后13 h取出并培养,然后在13,15,17,20 h进行核移植操作.每个时间点的核移植操作在1 h内完成,重构的胚胎培养1 h后进行激活.结果显示:在体内老化实验中,注射hCG后13 h取卵,获得的克隆囊胚发育率最高,为56.0%,15 h取卵仍维持了其支持胚胎体外发育的能力,但17 h及更长时间后取的卵,重构后的囊胚发育率显著下降(18.1%).注射hCG后15 h取的卵孤雌发育率最高(囊胚发育率为90.1%),并在17 h仍维持较高的孤雌发育能力,在20 h显著下降.在体外老化试验中,于注射hCG后13 h取卵,分别于13,15,17 h重构,都获得了较高的囊胚发育率(分别为57.7%,52.2%,46.3%),而在注射hCG后20 h重构,囊胚发育率显著下降(14.8%).体外老化的孤雌胚在注射hCG后22 h激活时囊胚发育率显著下降.结果表明:卵母细胞在体内和体外老化都影响克隆胚的体外发育,最佳取卵时间为注射hCG后13 h,取卵后立即用于重构可获得最佳囊胚发育率;体内、外老化卵支持重构胚较好发育的时间间隔是不同的,体内老化卵支持重构胚发育能力从注射hCG后17 h开始下降,体外老化卵则发生在20 h.这些结果可以指导操作,有利于在应用核移植进行其他基础研究时降低操作引起的误差.
就小鼠卵母細胞的卵齡對剋隆胚的體外髮育能力的影響進行瞭檢測,以確定最佳的取卵時間,以及取卵後進行覈移植操作的可耐受的時間.採用PMSG和hCG超排B6D2F1雌鼠.在體內老化實驗中,分彆于註射hCG後13,15,17,20 h取卵用于覈移植操作;在體外老化實驗中,所有的卵均于註射hCG後13 h取齣併培養,然後在13,15,17,20 h進行覈移植操作.每箇時間點的覈移植操作在1 h內完成,重構的胚胎培養1 h後進行激活.結果顯示:在體內老化實驗中,註射hCG後13 h取卵,穫得的剋隆囊胚髮育率最高,為56.0%,15 h取卵仍維持瞭其支持胚胎體外髮育的能力,但17 h及更長時間後取的卵,重構後的囊胚髮育率顯著下降(18.1%).註射hCG後15 h取的卵孤雌髮育率最高(囊胚髮育率為90.1%),併在17 h仍維持較高的孤雌髮育能力,在20 h顯著下降.在體外老化試驗中,于註射hCG後13 h取卵,分彆于13,15,17 h重構,都穫得瞭較高的囊胚髮育率(分彆為57.7%,52.2%,46.3%),而在註射hCG後20 h重構,囊胚髮育率顯著下降(14.8%).體外老化的孤雌胚在註射hCG後22 h激活時囊胚髮育率顯著下降.結果錶明:卵母細胞在體內和體外老化都影響剋隆胚的體外髮育,最佳取卵時間為註射hCG後13 h,取卵後立即用于重構可穫得最佳囊胚髮育率;體內、外老化卵支持重構胚較好髮育的時間間隔是不同的,體內老化卵支持重構胚髮育能力從註射hCG後17 h開始下降,體外老化卵則髮生在20 h.這些結果可以指導操作,有利于在應用覈移植進行其他基礎研究時降低操作引起的誤差.
취소서란모세포적란령대극륭배적체외발육능력적영향진행료검측,이학정최가적취란시간,이급취란후진행핵이식조작적가내수적시간.채용PMSG화hCG초배B6D2F1자서.재체내노화실험중,분별우주사hCG후13,15,17,20 h취란용우핵이식조작;재체외노화실험중,소유적란균우주사hCG후13 h취출병배양,연후재13,15,17,20 h진행핵이식조작.매개시간점적핵이식조작재1 h내완성,중구적배태배양1 h후진행격활.결과현시:재체내노화실험중,주사hCG후13 h취란,획득적극륭낭배발육솔최고,위56.0%,15 h취란잉유지료기지지배태체외발육적능력,단17 h급경장시간후취적란,중구후적낭배발육솔현저하강(18.1%).주사hCG후15 h취적란고자발육솔최고(낭배발육솔위90.1%),병재17 h잉유지교고적고자발육능력,재20 h현저하강.재체외노화시험중,우주사hCG후13 h취란,분별우13,15,17 h중구,도획득료교고적낭배발육솔(분별위57.7%,52.2%,46.3%),이재주사hCG후20 h중구,낭배발육솔현저하강(14.8%).체외노화적고자배재주사hCG후22 h격활시낭배발육솔현저하강.결과표명:란모세포재체내화체외노화도영향극륭배적체외발육,최가취란시간위주사hCG후13 h,취란후립즉용우중구가획득최가낭배발육솔;체내、외노화란지지중구배교호발육적시간간격시불동적,체내노화란지지중구배발육능력종주사hCG후17 h개시하강,체외노화란칙발생재20 h.저사결과가이지도조작,유리우재응용핵이식진행기타기출연구시강저조작인기적오차.
