组织工程与重建外科杂志
組織工程與重建外科雜誌
조직공정여중건외과잡지
JOURNAL OF TISSUE ENGINEERING AND RECONSTRUCTIVE SURGERY
2008年
1期
30-35
,共6页
王爱丽%杨平%徐顺%顾耀辉%黄静%陈波%贾卿%吴志宏
王愛麗%楊平%徐順%顧耀輝%黃靜%陳波%賈卿%吳誌宏
왕애려%양평%서순%고요휘%황정%진파%가경%오지굉
一氧化氮合酶%增生性瘢痕%成纤维细胞%硝普钠%N-硝基-L-精氨酸甲酯
一氧化氮閤酶%增生性瘢痕%成纖維細胞%硝普鈉%N-硝基-L-精氨痠甲酯
일양화담합매%증생성반흔%성섬유세포%초보납%N-초기-L-정안산갑지
目的 观察一氧化氮合酶(Nitrogen oxide synthetase,NOS)在增生性瘢痕与正常皮肤组织及细胞中的表达特征及其差别,并通过应用NO供体或NOS抑制剂对培养的瘢痕成纤维细胞进行体外药物干扰,探索NO、NOS在增生性瘢痕形成中的作用.方法 取临床增牛性瘢痕手术病人的瘢痕组织及周围少许正常皮肤,体外培养获得皮肤和瘢痕成纤维细胞,通过免疫细胞化学及RT-PCR方法比较两种组织及细胞中NOS的表达及分布的差异.分别以100～500μM的NO供体硝普钠(Sodium nitroprussicle,SNP)、NOS抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-Arginine methyl,L-NAME)作用于瘢痕成纤维细胞,观察细胞增殖的变化;并用免疫细胞化学和RT-PCR方法比较作用前后成纤维细胞中Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的变化.结果 免疫组化检测及RT-PCR方法检测显示增生性瘢痕组织及细胞中NOS表达相对于皮肤组织及成纤维细胞中明显减少(p＜0.05).瘢痕细胞经SNP作用后,细胞增殖显著降低.免疫细胞化学方法和RT -PCR方法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原结果显示,从SNP 200μM组开始Ⅰ、Ⅲ型胶原表达显著降低(p＜0.05).经L-NAME 200μM作用后,Ⅰ、Ⅲ型胶原表达显著增加(p＜0.05).结论 增生性瘢痕组织及细胞中NOS含量较正常皮肤组织及细胞明显减少,NO供体SNP对体外培养的增生性瘢痕成纤维细胞增殖以及胶原表达起到抑制作用,NOS抑制剂L-NAME对其胶原表达则起到促进作用,结果提示NOS表达降低可能与瘢痕增生密切相关,因此改变NO的产生及NOS的活性可望调控瘢痕成纤维细胞的生物学行为.
目的 觀察一氧化氮閤酶(Nitrogen oxide synthetase,NOS)在增生性瘢痕與正常皮膚組織及細胞中的錶達特徵及其差彆,併通過應用NO供體或NOS抑製劑對培養的瘢痕成纖維細胞進行體外藥物榦擾,探索NO、NOS在增生性瘢痕形成中的作用.方法 取臨床增牛性瘢痕手術病人的瘢痕組織及週圍少許正常皮膚,體外培養穫得皮膚和瘢痕成纖維細胞,通過免疫細胞化學及RT-PCR方法比較兩種組織及細胞中NOS的錶達及分佈的差異.分彆以100～500μM的NO供體硝普鈉(Sodium nitroprussicle,SNP)、NOS抑製劑N-硝基-L-精氨痠甲酯(L-Arginine methyl,L-NAME)作用于瘢痕成纖維細胞,觀察細胞增殖的變化;併用免疫細胞化學和RT-PCR方法比較作用前後成纖維細胞中Ⅰ、Ⅲ型膠原錶達的變化.結果 免疫組化檢測及RT-PCR方法檢測顯示增生性瘢痕組織及細胞中NOS錶達相對于皮膚組織及成纖維細胞中明顯減少(p＜0.05).瘢痕細胞經SNP作用後,細胞增殖顯著降低.免疫細胞化學方法和RT -PCR方法檢測Ⅰ、Ⅲ型膠原結果顯示,從SNP 200μM組開始Ⅰ、Ⅲ型膠原錶達顯著降低(p＜0.05).經L-NAME 200μM作用後,Ⅰ、Ⅲ型膠原錶達顯著增加(p＜0.05).結論 增生性瘢痕組織及細胞中NOS含量較正常皮膚組織及細胞明顯減少,NO供體SNP對體外培養的增生性瘢痕成纖維細胞增殖以及膠原錶達起到抑製作用,NOS抑製劑L-NAME對其膠原錶達則起到促進作用,結果提示NOS錶達降低可能與瘢痕增生密切相關,因此改變NO的產生及NOS的活性可望調控瘢痕成纖維細胞的生物學行為.
목적 관찰일양화담합매(Nitrogen oxide synthetase,NOS)재증생성반흔여정상피부조직급세포중적표체특정급기차별,병통과응용NO공체혹NOS억제제대배양적반흔성섬유세포진행체외약물간우,탐색NO、NOS재증생성반흔형성중적작용.방법 취림상증우성반흔수술병인적반흔조직급주위소허정상피부,체외배양획득피부화반흔성섬유세포,통과면역세포화학급RT-PCR방법비교량충조직급세포중NOS적표체급분포적차이.분별이100～500μM적NO공체초보납(Sodium nitroprussicle,SNP)、NOS억제제N-초기-L-정안산갑지(L-Arginine methyl,L-NAME)작용우반흔성섬유세포,관찰세포증식적변화;병용면역세포화학화RT-PCR방법비교작용전후성섬유세포중Ⅰ、Ⅲ형효원표체적변화.결과 면역조화검측급RT-PCR방법검측현시증생성반흔조직급세포중NOS표체상대우피부조직급성섬유세포중명현감소(p＜0.05).반흔세포경SNP작용후,세포증식현저강저.면역세포화학방법화RT -PCR방법검측Ⅰ、Ⅲ형효원결과현시,종SNP 200μM조개시Ⅰ、Ⅲ형효원표체현저강저(p＜0.05).경L-NAME 200μM작용후,Ⅰ、Ⅲ형효원표체현저증가(p＜0.05).결론 증생성반흔조직급세포중NOS함량교정상피부조직급세포명현감소,NO공체SNP대체외배양적증생성반흔성섬유세포증식이급효원표체기도억제작용,NOS억제제L-NAME대기효원표체칙기도촉진작용,결과제시NOS표체강저가능여반흔증생밀절상관,인차개변NO적산생급NOS적활성가망조공반흔성섬유세포적생물학행위.
