医学分子生物学杂志
醫學分子生物學雜誌
의학분자생물학잡지
FOREIGN MEDICAL SCIENCES
2011年
3期
198-203
,共6页
赵虹%高星杰%葛林%朱梦瑜%段中潮%宋娟%付雪%杨洁
趙虹%高星傑%葛林%硃夢瑜%段中潮%宋娟%付雪%楊潔
조홍%고성걸%갈림%주몽유%단중조%송연%부설%양길
人类Tudor-SN蛋白%启动子%重组质粒%虫荧光素酶
人類Tudor-SN蛋白%啟動子%重組質粒%蟲熒光素酶
인류Tudor-SN단백%계동자%중조질립%충형광소매
目的 将人类Tudor-SN基因的启动子序列片段定向连入pGL3-Basic质粒载体,并进行鉴定和启动子活性检测.方法 以HeLa细胞全基因组DNA为模板,PCR法扩增出目的基因,利用XhoⅠ和HindⅢ双酶切法将目的片段连接到pGL3-Basic载体上.再将构建成功的pGL3-Basic-Tudor-SN-promoter重组质粒和内参质粒β-gal瞬时共转染入宫颈癌HeLa细胞,培养48 h后检测萤火虫荧光素酶活性.结果 双酶切和基因测序法鉴定构建的重组质粒无误,转染重组质粒后可检测到萤火虫荧光素酶活性.结论 成功构建了人类Tudor-SN基因启动子重组质粒,为Tudor-SN蛋白基因调控机制的研究奠定基础.
目的 將人類Tudor-SN基因的啟動子序列片段定嚮連入pGL3-Basic質粒載體,併進行鑒定和啟動子活性檢測.方法 以HeLa細胞全基因組DNA為模闆,PCR法擴增齣目的基因,利用XhoⅠ和HindⅢ雙酶切法將目的片段連接到pGL3-Basic載體上.再將構建成功的pGL3-Basic-Tudor-SN-promoter重組質粒和內參質粒β-gal瞬時共轉染入宮頸癌HeLa細胞,培養48 h後檢測螢火蟲熒光素酶活性.結果 雙酶切和基因測序法鑒定構建的重組質粒無誤,轉染重組質粒後可檢測到螢火蟲熒光素酶活性.結論 成功構建瞭人類Tudor-SN基因啟動子重組質粒,為Tudor-SN蛋白基因調控機製的研究奠定基礎.
목적 장인류Tudor-SN기인적계동자서렬편단정향련입pGL3-Basic질립재체,병진행감정화계동자활성검측.방법 이HeLa세포전기인조DNA위모판,PCR법확증출목적기인,이용XhoⅠ화HindⅢ쌍매절법장목적편단련접도pGL3-Basic재체상.재장구건성공적pGL3-Basic-Tudor-SN-promoter중조질립화내삼질립β-gal순시공전염입궁경암HeLa세포,배양48 h후검측형화충형광소매활성.결과 쌍매절화기인측서법감정구건적중조질립무오,전염중조질립후가검측도형화충형광소매활성.결론 성공구건료인류Tudor-SN기인계동자중조질립,위Tudor-SN단백기인조공궤제적연구전정기출.
