农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2011年
5期
808-815
,共8页
梁明炜%刘海峰%陆雪莹%李艳红%宋武%鲁春芳%肖向文%李晓波
樑明煒%劉海峰%陸雪瑩%李豔紅%宋武%魯春芳%肖嚮文%李曉波
량명위%류해봉%륙설형%리염홍%송무%로춘방%초향문%리효파
类黄酮3'-羟化酶%棕色棉%RACE
類黃酮3'-羥化酶%棕色棉%RACE
류황동3'-간화매%종색면%RACE
为探讨花色苷途径在彩棉色素形成中的作用及彩棉色素形成规律,本研究根据葡萄(Vitis vinifera 的类黄酮3'-羟化酶(flavonoid 3'-hydroxylase,F3'H)基因全长cDNA序列blast所得棉花(Gossypium hirsutum)的EST序列(GenBank登录号:DT545210,CO071403和BG447485)设计引物,以开花后16d的新彩棉5号(XC-5)纤维为材料,采用RACE(rapid amplification of cDNA ends)和RT-PCR方法分离得到了2个类黄酮3'-羟化酶基因的全长cDNA序列,长度为1 761和1 892 bp,均含有一个97~1 629 bp、长度为1 533 bp的开放阅读框,编码510个氨基酸,将这两个序列命名为GhF3'H-1和GhF3'H-2,分别提交GenBank,登录号为HM598123和HM598124,此2个序列编码区完全相同,仅在3'非翻译区(UTR)存在片段长短的差异.半定量RT-PCR检测花色苷合成途径中查尔酮合成酶(chalcone synathase,CHS)基因、F3'H、类黄酮3',5'-羟化酶(flavonoid 3',5'-hydroxylase,F3'5'H)基因在不同色泽的棕色品种中时空表达特性,结果显示,CHS和F3'5'H'基因在白棉和彩棉中花、纤维和胚珠中均有着较高水平的表达,而F3'H基因主要在开花后1d胚珠中有一定表达,在纤维和花瓣中基本不表达.研究结果认为,棕色棉纤维色素形成与花色苷的合成可能存在相关性,进一步揭示了彩棉色素形成的基本机制,为用基因工程手段改良彩棉色彩提供了基础.
為探討花色苷途徑在綵棉色素形成中的作用及綵棉色素形成規律,本研究根據葡萄(Vitis vinifera 的類黃酮3'-羥化酶(flavonoid 3'-hydroxylase,F3'H)基因全長cDNA序列blast所得棉花(Gossypium hirsutum)的EST序列(GenBank登錄號:DT545210,CO071403和BG447485)設計引物,以開花後16d的新綵棉5號(XC-5)纖維為材料,採用RACE(rapid amplification of cDNA ends)和RT-PCR方法分離得到瞭2箇類黃酮3'-羥化酶基因的全長cDNA序列,長度為1 761和1 892 bp,均含有一箇97~1 629 bp、長度為1 533 bp的開放閱讀框,編碼510箇氨基痠,將這兩箇序列命名為GhF3'H-1和GhF3'H-2,分彆提交GenBank,登錄號為HM598123和HM598124,此2箇序列編碼區完全相同,僅在3'非翻譯區(UTR)存在片段長短的差異.半定量RT-PCR檢測花色苷閤成途徑中查爾酮閤成酶(chalcone synathase,CHS)基因、F3'H、類黃酮3',5'-羥化酶(flavonoid 3',5'-hydroxylase,F3'5'H)基因在不同色澤的棕色品種中時空錶達特性,結果顯示,CHS和F3'5'H'基因在白棉和綵棉中花、纖維和胚珠中均有著較高水平的錶達,而F3'H基因主要在開花後1d胚珠中有一定錶達,在纖維和花瓣中基本不錶達.研究結果認為,棕色棉纖維色素形成與花色苷的閤成可能存在相關性,進一步揭示瞭綵棉色素形成的基本機製,為用基因工程手段改良綵棉色綵提供瞭基礎.
위탐토화색감도경재채면색소형성중적작용급채면색소형성규률,본연구근거포도(Vitis vinifera 적류황동3'-간화매(flavonoid 3'-hydroxylase,F3'H)기인전장cDNA서렬blast소득면화(Gossypium hirsutum)적EST서렬(GenBank등록호:DT545210,CO071403화BG447485)설계인물,이개화후16d적신채면5호(XC-5)섬유위재료,채용RACE(rapid amplification of cDNA ends)화RT-PCR방법분리득도료2개류황동3'-간화매기인적전장cDNA서렬,장도위1 761화1 892 bp,균함유일개97~1 629 bp、장도위1 533 bp적개방열독광,편마510개안기산,장저량개서렬명명위GhF3'H-1화GhF3'H-2,분별제교GenBank,등록호위HM598123화HM598124,차2개서렬편마구완전상동,부재3'비번역구(UTR)존재편단장단적차이.반정량RT-PCR검측화색감합성도경중사이동합성매(chalcone synathase,CHS)기인、F3'H、류황동3',5'-간화매(flavonoid 3',5'-hydroxylase,F3'5'H)기인재불동색택적종색품충중시공표체특성,결과현시,CHS화F3'5'H'기인재백면화채면중화、섬유화배주중균유착교고수평적표체,이F3'H기인주요재개화후1d배주중유일정표체,재섬유화화판중기본불표체.연구결과인위,종색면섬유색소형성여화색감적합성가능존재상관성,진일보게시료채면색소형성적기본궤제,위용기인공정수단개량채면색채제공료기출.