CAJ | 학술논문

目的动态观察三硝基苯磺酸(TNBS)胰管内注射诱导大鼠胰腺纤维化过程中胰腺星状细胞(PSC)的活化情况,并研究PSC相关介质转化生长因子β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和Ⅰ型胶原蛋白表达,探讨PSC在胰腺纤维化形成过程中的作用.方法通过胰管内注射含2%TNBS的乙醇磷酸盐缓冲液诱导大鼠胰腺纤维化模型,并分别于术后72 h和3、4、5、6、7周处死大鼠,留取胰腺组织.胰腺组织切片经HE染色,光镜下观察病理学变化.分别用免疫组化、RT-PCR、Western blot检测胰腺组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、TGF-β1、MMP-2 mRNA和Ⅰ型胶原蛋白表达;电镜观察不同时点胰腺组织超微结构变化.结果2%TNBS胰管内注射后早期主要以胰腺组织炎症、水肿、坏死为主,3周后则以纤维组织增生、腺泡萎缩、胶原沉积等纤维化表现为主,以第4周为甚.第3周时α-SMA表达量较少,第4周时则显著增多,而后又渐减.第3周时胰腺组织TGF-β1蛋白表达显著增加,4周时达峰值.正常胰腺组织仅有极微量MMP-2 mRNA表达,而制模早期胰腺组织即有MMP-2 mRNA表达显著增加,随时间延长其表达量呈波动性变化,但仍明显高于正常.正常胰腺组织间质有少量Ⅰ型胶原表达,而在胰腺纤维化区域则可见大量Ⅰ型胶原沉积.结论PSC可能参与了TNBS诱导的大鼠胰腺纤维化的发生与发展过程;而此作用可能是PSC在促纤维化因子TGF-31作用下活化,并合成Ⅰ型胶原等细胞外基质、分泌MMP-2等细胞外基质代谢相关酶而实现.
목적동태관찰삼초기분광산(TNBS)이관내주사유도대서이선섬유화과정중이선성상세포(PSC)적활화정황,병연구PSC상관개질전화생장인자β1(TGF-β1)、기질금속단백매-2(MMP-2)화Ⅰ형효원단백표체,탐토PSC재이선섬유화형성과정중적작용.방법통과이관내주사함2%TNBS적을순린산염완충액유도대서이선섬유화모형,병분별우술후72 h화3、4、5、6、7주처사대서,류취이선조직.이선조직절편경HE염색,광경하관찰병이학변화.분별용면역조화、RT-PCR、Western blot검측이선조직α-평활기기동단백(α-SMA)、TGF-β1、MMP-2 mRNA화Ⅰ형효원단백표체;전경관찰불동시점이선조직초미결구변화.결과2%TNBS이관내주사후조기주요이이선조직염증、수종、배사위주,3주후칙이섬유조직증생、선포위축、효원침적등섬유화표현위주,이제4주위심.제3주시α-SMA표체량교소,제4주시칙현저증다,이후우점감.제3주시이선조직TGF-β1단백표체현저증가,4주시체봉치.정상이선조직부유겁미량MMP-2 mRNA표체,이제모조기이선조직즉유MMP-2 mRNA표체현저증가,수시간연장기표체량정파동성변화,단잉명현고우정상.정상이선조직간질유소량Ⅰ형효원표체,이재이선섬유화구역칙가견대량Ⅰ형효원침적.결론PSC가능삼여료TNBS유도적대서이선섬유화적발생여발전과정;이차작용가능시PSC재촉섬유화인자TGF-31작용하활화,병합성Ⅰ형효원등세포외기질、분비MMP-2등세포외기질대사상관매이실현.