四川大学学报（医学版）
四川大學學報（醫學版）
사천대학학보（의학판）
JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE EDITION)
2005年
2期
200-203
,共4页
孟玲%许欣%汪东篱%占利%裴晓方
孟玲%許訢%汪東籬%佔利%裴曉方
맹령%허흔%왕동리%점리%배효방
耐辐射奇球菌%超氧化物歧化酶%基因克隆
耐輻射奇毬菌%超氧化物歧化酶%基因剋隆
내복사기구균%초양화물기화매%기인극륭
目的构建耐辐射奇球菌(D.radiodurans)锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)基因的原核表达重组子,并在E.coli BL21(DE3)中表达.方法用PCR方法自D.radiodurans基因组中扩增Mn-SOD目的片段.将该基因与原核表达质粒载体pET-30a(+)连接,构建重组质粒pET-SOD,并转化表达宿主菌E.coli BL21(DE3).用异丙基硫代-βD-半乳糖苷(IPTG)诱导重组SOD蛋白表达,SDS-PAGE分析表达产物.结果获得了D.radioduransMn-SOD基因的pET原核表达重组质粒,该质粒经IPTG诱导能在E.coli BL21(DE3)中高效表达目的蛋白,蛋白活性可达51 800 U/g湿菌体.结论成功构建了原核表达重组质粒pET-SOD,实现了SOD在原核细胞中的高效表达,表达产物活性较高,为重组D.radiodurans Mn-SOD的进一步研究和应用奠定了基础.
目的構建耐輻射奇毬菌(D.radiodurans)錳超氧化物歧化酶(Mn-SOD)基因的原覈錶達重組子,併在E.coli BL21(DE3)中錶達.方法用PCR方法自D.radiodurans基因組中擴增Mn-SOD目的片段.將該基因與原覈錶達質粒載體pET-30a(+)連接,構建重組質粒pET-SOD,併轉化錶達宿主菌E.coli BL21(DE3).用異丙基硫代-βD-半乳糖苷(IPTG)誘導重組SOD蛋白錶達,SDS-PAGE分析錶達產物.結果穫得瞭D.radioduransMn-SOD基因的pET原覈錶達重組質粒,該質粒經IPTG誘導能在E.coli BL21(DE3)中高效錶達目的蛋白,蛋白活性可達51 800 U/g濕菌體.結論成功構建瞭原覈錶達重組質粒pET-SOD,實現瞭SOD在原覈細胞中的高效錶達,錶達產物活性較高,為重組D.radiodurans Mn-SOD的進一步研究和應用奠定瞭基礎.
목적구건내복사기구균(D.radiodurans)맹초양화물기화매(Mn-SOD)기인적원핵표체중조자,병재E.coli BL21(DE3)중표체.방법용PCR방법자D.radiodurans기인조중확증Mn-SOD목적편단.장해기인여원핵표체질립재체pET-30a(+)련접,구건중조질립pET-SOD,병전화표체숙주균E.coli BL21(DE3).용이병기류대-βD-반유당감(IPTG)유도중조SOD단백표체,SDS-PAGE분석표체산물.결과획득료D.radioduransMn-SOD기인적pET원핵표체중조질립,해질립경IPTG유도능재E.coli BL21(DE3)중고효표체목적단백,단백활성가체51 800 U/g습균체.결론성공구건료원핵표체중조질립pET-SOD,실현료SOD재원핵세포중적고효표체,표체산물활성교고,위중조D.radiodurans Mn-SOD적진일보연구화응용전정료기출.
