华中师范大学学报（自然科学版）
華中師範大學學報（自然科學版）
화중사범대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF CENTRAL CHINA NORMAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCES)
2005年
2期
241-244
,共4页
李江%闫建平%蔡全信%袁志明
李江%閆建平%蔡全信%袁誌明
리강%염건평%채전신%원지명
苏云金芽孢杆菌%营养期杀虫蛋白%vip3A基因%克隆%表达
囌雲金芽孢桿菌%營養期殺蟲蛋白%vip3A基因%剋隆%錶達
소운금아포간균%영양기살충단백%vip3A기인%극륭%표체
选择本实验室分离的野生型苏云金芽孢杆菌菌株WY-197为出发菌株,用全长PCR方法从此菌株中克隆了2.3 kb大小的vip3A基因.DNA序列比较发现所克隆的基因vip3A-1 97与已知的营养期杀虫蛋白基因存在很高的同源性.将基因vip3A-197亚克隆至原核表达载体pET33 b构建了原核表达质粒pEVip,转化大肠杆菌BL21,转化子经IPTG诱导后可表达88 kD大小的蛋白.该蛋白对甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)和棉铃虫(Helicoverpa armigera)的初孵幼虫进行生物测定,结果表明,营养期杀虫蛋白vip3A-197对夜蛾科害虫具有一定的杀虫活性.
選擇本實驗室分離的野生型囌雲金芽孢桿菌菌株WY-197為齣髮菌株,用全長PCR方法從此菌株中剋隆瞭2.3 kb大小的vip3A基因.DNA序列比較髮現所剋隆的基因vip3A-1 97與已知的營養期殺蟲蛋白基因存在很高的同源性.將基因vip3A-197亞剋隆至原覈錶達載體pET33 b構建瞭原覈錶達質粒pEVip,轉化大腸桿菌BL21,轉化子經IPTG誘導後可錶達88 kD大小的蛋白.該蛋白對甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)和棉鈴蟲(Helicoverpa armigera)的初孵幼蟲進行生物測定,結果錶明,營養期殺蟲蛋白vip3A-197對夜蛾科害蟲具有一定的殺蟲活性.
선택본실험실분리적야생형소운금아포간균균주WY-197위출발균주,용전장PCR방법종차균주중극륭료2.3 kb대소적vip3A기인.DNA서렬비교발현소극륭적기인vip3A-1 97여이지적영양기살충단백기인존재흔고적동원성.장기인vip3A-197아극륭지원핵표체재체pET33 b구건료원핵표체질립pEVip,전화대장간균BL21,전화자경IPTG유도후가표체88 kD대소적단백.해단백대첨채야아(Spodoptera exigua)화면령충(Helicoverpa armigera)적초부유충진행생물측정,결과표명,영양기살충단백vip3A-197대야아과해충구유일정적살충활성.
