中国临床解剖学杂志
中國臨床解剖學雜誌
중국림상해부학잡지
CHINESE JOURNAL OF CLINICAL ANATOMY
2008年
2期
171-174
,共4页
黄涛%徐如祥%姜晓丹%韩富%张志强%谢才军%杜谋选%邹雨汐
黃濤%徐如祥%薑曉丹%韓富%張誌彊%謝纔軍%杜謀選%鄒雨汐
황도%서여상%강효단%한부%장지강%사재군%두모선%추우석
骨髓基质细胞%细胞培养%表面抗原
骨髓基質細胞%細胞培養%錶麵抗原
골수기질세포%세포배양%표면항원
目的:分离、纯化培养大鼠BMSCs,对其生物学特性进行检测和鉴定.方法:取大鼠长骨中的骨髓组织,以淋巴分离液梯度离心获得有核细胞层,分别以本实验室BMSCs专用培养基接种培养,经多次换液得到较纯的BMSCs,倒置相差显微镜下观察细胞形态.选择CD44、CD31、CD45、CD29、CD34及flk1,应用流式细胞仪对细胞的表面抗原标志进行检测.结果:倒置相差显微镜观察发现,接种后的24h内,有核细胞(包含骨髓基质细胞)开始贴壁,4～7 d,贴壁细胞出现明显分裂增殖,10～14 d细胞增殖旺盛,可见明显的细胞克隆团,贴壁牢靠.20d左右,在本实验室专用BMSCs培养基培养下,绝大多数细胞逐渐分化呈梭形、三角形或多角形,核为圆形或类圆形、居中,这些细胞发出的突起逐渐生长延伸并彼此相连,形态学上具有神经系细胞的明显特征.细胞表面抗原检测显示所培养的BMSCs为:CD34-、CD45-、CD31-、tlk1-、CD29+、CD44+,与文献报道一致.结论:所采用的细胞分离培养方法简便可行,所获得的细胞其表型特征与文献报道一致,确为BMSCs.
目的:分離、純化培養大鼠BMSCs,對其生物學特性進行檢測和鑒定.方法:取大鼠長骨中的骨髓組織,以淋巴分離液梯度離心穫得有覈細胞層,分彆以本實驗室BMSCs專用培養基接種培養,經多次換液得到較純的BMSCs,倒置相差顯微鏡下觀察細胞形態.選擇CD44、CD31、CD45、CD29、CD34及flk1,應用流式細胞儀對細胞的錶麵抗原標誌進行檢測.結果:倒置相差顯微鏡觀察髮現,接種後的24h內,有覈細胞(包含骨髓基質細胞)開始貼壁,4～7 d,貼壁細胞齣現明顯分裂增殖,10～14 d細胞增殖旺盛,可見明顯的細胞剋隆糰,貼壁牢靠.20d左右,在本實驗室專用BMSCs培養基培養下,絕大多數細胞逐漸分化呈梭形、三角形或多角形,覈為圓形或類圓形、居中,這些細胞髮齣的突起逐漸生長延伸併彼此相連,形態學上具有神經繫細胞的明顯特徵.細胞錶麵抗原檢測顯示所培養的BMSCs為:CD34-、CD45-、CD31-、tlk1-、CD29+、CD44+,與文獻報道一緻.結論:所採用的細胞分離培養方法簡便可行,所穫得的細胞其錶型特徵與文獻報道一緻,確為BMSCs.
목적:분리、순화배양대서BMSCs,대기생물학특성진행검측화감정.방법:취대서장골중적골수조직,이림파분리액제도리심획득유핵세포층,분별이본실험실BMSCs전용배양기접충배양,경다차환액득도교순적BMSCs,도치상차현미경하관찰세포형태.선택CD44、CD31、CD45、CD29、CD34급flk1,응용류식세포의대세포적표면항원표지진행검측.결과:도치상차현미경관찰발현,접충후적24h내,유핵세포(포함골수기질세포)개시첩벽,4～7 d,첩벽세포출현명현분렬증식,10～14 d세포증식왕성,가견명현적세포극륭단,첩벽뢰고.20d좌우,재본실험실전용BMSCs배양기배양하,절대다수세포축점분화정사형、삼각형혹다각형,핵위원형혹류원형、거중,저사세포발출적돌기축점생장연신병피차상련,형태학상구유신경계세포적명현특정.세포표면항원검측현시소배양적BMSCs위:CD34-、CD45-、CD31-、tlk1-、CD29+、CD44+,여문헌보도일치.결론:소채용적세포분리배양방법간편가행,소획득적세포기표형특정여문헌보도일치,학위BMSCs.
