中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2008年
8期
1061-1064
,共4页
卢觅佳%周国亮%沈敏%徐潘生%张立将%吴友苹%宣尧仙
盧覓佳%週國亮%瀋敏%徐潘生%張立將%吳友蘋%宣堯仙
로멱가%주국량%침민%서반생%장립장%오우평%선요선
腺病毒载体疫苗%表达%细胞毒性%免疫细胞化学%MTT法%流式细胞术
腺病毒載體疫苗%錶達%細胞毒性%免疫細胞化學%MTT法%流式細胞術
선병독재체역묘%표체%세포독성%면역세포화학%MTT법%류식세포술
目的 探讨一个以腺病毒为载体的人用疫苗(代号LMP-Ad)在传代动物细胞株上的表达能力和细胞毒性,为动物试验提供依据.方法 受试物LMP-Ad以不同感染复数(MOI=3000、1000、300、100和30)感染非洲绿猴肾细胞(Veto)、幼仓鼠肾细胞(BHK)、小鼠成纤维细胞(1929)和人胚肺二倍体细胞(KMB17)4种传代细胞株后,用免疫细胞化学染色法检测目的 蛋白LMP在细胞膜上的表达情况;在MOI=3×103、3×104、3 × 103、3×102和30时,用MTT法和FCM检测细胞相对增殖率(RGR)和细胞死亡率.结果 在4种细胞巾均检测到目的 蛋白的表达,其中BHK细胞呈弱阳性,而Vero和KMB17在MOI低至30时仍较好地表达目的 蛋白;随着感染剂量的提高,4种细胞的RGR下降而死亡率上升,其中以Vero细胞的变化最为明显.结论 受试物对上述细胞均具生物活性,并在高感染剂量时表现出对细胞的生长抑制和一定程度的损伤,4种细胞以Vero和KMB17对受试物最为敏感,更适于作为该类新药的体外研究模型.
目的 探討一箇以腺病毒為載體的人用疫苗(代號LMP-Ad)在傳代動物細胞株上的錶達能力和細胞毒性,為動物試驗提供依據.方法 受試物LMP-Ad以不同感染複數(MOI=3000、1000、300、100和30)感染非洲綠猴腎細胞(Veto)、幼倉鼠腎細胞(BHK)、小鼠成纖維細胞(1929)和人胚肺二倍體細胞(KMB17)4種傳代細胞株後,用免疫細胞化學染色法檢測目的 蛋白LMP在細胞膜上的錶達情況;在MOI=3×103、3×104、3 × 103、3×102和30時,用MTT法和FCM檢測細胞相對增殖率(RGR)和細胞死亡率.結果 在4種細胞巾均檢測到目的 蛋白的錶達,其中BHK細胞呈弱暘性,而Vero和KMB17在MOI低至30時仍較好地錶達目的 蛋白;隨著感染劑量的提高,4種細胞的RGR下降而死亡率上升,其中以Vero細胞的變化最為明顯.結論 受試物對上述細胞均具生物活性,併在高感染劑量時錶現齣對細胞的生長抑製和一定程度的損傷,4種細胞以Vero和KMB17對受試物最為敏感,更適于作為該類新藥的體外研究模型.
목적 탐토일개이선병독위재체적인용역묘(대호LMP-Ad)재전대동물세포주상적표체능력화세포독성,위동물시험제공의거.방법 수시물LMP-Ad이불동감염복수(MOI=3000、1000、300、100화30)감염비주록후신세포(Veto)、유창서신세포(BHK)、소서성섬유세포(1929)화인배폐이배체세포(KMB17)4충전대세포주후,용면역세포화학염색법검측목적 단백LMP재세포막상적표체정황;재MOI=3×103、3×104、3 × 103、3×102화30시,용MTT법화FCM검측세포상대증식솔(RGR)화세포사망솔.결과 재4충세포건균검측도목적 단백적표체,기중BHK세포정약양성,이Vero화KMB17재MOI저지30시잉교호지표체목적 단백;수착감염제량적제고,4충세포적RGR하강이사망솔상승,기중이Vero세포적변화최위명현.결론 수시물대상술세포균구생물활성,병재고감염제량시표현출대세포적생장억제화일정정도적손상,4충세포이Vero화KMB17대수시물최위민감,경괄우작위해류신약적체외연구모형.
