CAJ | 학술논문

自根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)克隆获得attM基因.采用叶盘转化法,农杆菌介导转化烟草,经过卡那霉素抗性筛选获得抗性愈伤组织,对其分化产生的植物株系进行PCR、PCR-Southem和荧光定量PCR及GUS染色检测分析.结果表明:attM基因被成功插入烟草基因组DNA中.在转基因株系中均能够表达,相对表达量最大可达125.8,最小为31.0.以野生型烟草和转pB1121空载体的烟草为对照,分别进行了离体及活体检测试验,结果表明:转attM基因烟草植株对茄科雷尔氏菌引起的青枯病抗性显著.1×107～1×108 CFU·mL-1的青枯菌接种离体叶片,野生型烟草和转pB1121空载体的烟草的中毒面积与接种面积比值为15 ～25,转基因植株的比值低于3；青枯菌3×106 CFU·mL-1伤根接种盆栽烟草植株14 d,野生株和转空载体烟草均青枯死亡,病情指数为100,转基因植株病情指数为31.25.
자근암농간균(Agrobacterium tumefaciens)극륭획득attM기인.채용협반전화법,농간균개도전화연초,경과잡나매소항성사선획득항성유상조직,대기분화산생적식물주계진행PCR、PCR-Southem화형광정량PCR급GUS염색검측분석.결과표명:attM기인피성공삽입연초기인조DNA중.재전기인주계중균능구표체,상대표체량최대가체125.8,최소위31.0.이야생형연초화전pB1121공재체적연초위대조,분별진행료리체급활체검측시험,결과표명:전attM기인연초식주대가과뢰이씨균인기적청고병항성현저.1×107～1×108 CFU·mL-1적청고균접충리체협편,야생형연초화전pB1121공재체적연초적중독면적여접충면적비치위15 ～25,전기인식주적비치저우3；청고균3×106 CFU·mL-1상근접충분재연초식주14 d,야생주화전공재체연초균청고사망,병정지수위100,전기인식주병정지수위31.25.