上海交通大学学报（医学版）
上海交通大學學報（醫學版）
상해교통대학학보（의학판）
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE)
2012年
3期
288-292
,共5页
潘瑜%刘晓莉%束金莲%张霞%金惠敏
潘瑜%劉曉莉%束金蓮%張霞%金惠敏
반유%류효리%속금련%장하%금혜민
醛固酮%胰岛B细胞%细胞凋亡%蛋白激酶C
醛固酮%胰島B細胞%細胞凋亡%蛋白激酶C
철고동%이도B세포%세포조망%단백격매C
目的 探讨醛固酮对小鼠胰岛B细胞株MIN6细胞凋亡的影响及可能的作用机制.方法 体外培养的小鼠胰岛B细胞株MIN6分为对照组(加入无血清的DMEM培养基)、醛固酮组(加入10、100、1 000 nmol/L醛同酮进行干预)和醛固酮+拮抗剂组(以100 nmol/L醛固酮和100 nmol/L醛固酮拮抗剂螺内酯共同干预).采用MTT法检测细胞活性;放射免疫分析法检测葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS);流式细胞术结合FITC-Annexin V/PI荧光染色检测细胞凋亡;ELISA法检测细胞培养上清液中Caspas-3活性;Western blotting法检测凋亡相关蛋白细胞色素C(Cyt-C)、Bcl-2、Bax和磷酸化蛋白激酶C(p-Akt)的表达.结果 MIN6细胞增殖活性随醛固酮干预浓度的升高而下降,呈现浓度依赖性.在生理糖浓度(5.6 mmol/L)和高葡萄糖浓度(28 mmol/L)环境中,醛固酮组的GSIS均显著低于与对照组(P＜0.01),而醛固酮+拮抗剂组GSIS显著高于醛固酮组(P＜0.01).醛固酮组细胞凋亡率显著高于对照组(P＜0.01),而醛固酮+拮抗剂组细胞凋亡率显著低于醛固酮组(P＜0.01).与对照组比较,醛固酮组Caspase-3活性明显升高,Cyt-C表达上调,Bcl-2/Bax下降,p-Akt表达下调(均P＜0.01);而醛固酮+拮抗剂组对醛固酮组的Caspase-3活性升高及相关蛋白表达异常具有明显抑制作用.结论 醛固酮具有促进MIN6细胞凋亡的作用,其作用机制可能与Cyt-C、Bcl-2、Bax和Akt介导的线粒体信号途径有关.
目的 探討醛固酮對小鼠胰島B細胞株MIN6細胞凋亡的影響及可能的作用機製.方法 體外培養的小鼠胰島B細胞株MIN6分為對照組(加入無血清的DMEM培養基)、醛固酮組(加入10、100、1 000 nmol/L醛同酮進行榦預)和醛固酮+拮抗劑組(以100 nmol/L醛固酮和100 nmol/L醛固酮拮抗劑螺內酯共同榦預).採用MTT法檢測細胞活性;放射免疫分析法檢測葡萄糖刺激的胰島素分泌(GSIS);流式細胞術結閤FITC-Annexin V/PI熒光染色檢測細胞凋亡;ELISA法檢測細胞培養上清液中Caspas-3活性;Western blotting法檢測凋亡相關蛋白細胞色素C(Cyt-C)、Bcl-2、Bax和燐痠化蛋白激酶C(p-Akt)的錶達.結果 MIN6細胞增殖活性隨醛固酮榦預濃度的升高而下降,呈現濃度依賴性.在生理糖濃度(5.6 mmol/L)和高葡萄糖濃度(28 mmol/L)環境中,醛固酮組的GSIS均顯著低于與對照組(P＜0.01),而醛固酮+拮抗劑組GSIS顯著高于醛固酮組(P＜0.01).醛固酮組細胞凋亡率顯著高于對照組(P＜0.01),而醛固酮+拮抗劑組細胞凋亡率顯著低于醛固酮組(P＜0.01).與對照組比較,醛固酮組Caspase-3活性明顯升高,Cyt-C錶達上調,Bcl-2/Bax下降,p-Akt錶達下調(均P＜0.01);而醛固酮+拮抗劑組對醛固酮組的Caspase-3活性升高及相關蛋白錶達異常具有明顯抑製作用.結論 醛固酮具有促進MIN6細胞凋亡的作用,其作用機製可能與Cyt-C、Bcl-2、Bax和Akt介導的線粒體信號途徑有關.
목적 탐토철고동대소서이도B세포주MIN6세포조망적영향급가능적작용궤제.방법 체외배양적소서이도B세포주MIN6분위대조조(가입무혈청적DMEM배양기)、철고동조(가입10、100、1 000 nmol/L철동동진행간예)화철고동+길항제조(이100 nmol/L철고동화100 nmol/L철고동길항제라내지공동간예).채용MTT법검측세포활성;방사면역분석법검측포도당자격적이도소분비(GSIS);류식세포술결합FITC-Annexin V/PI형광염색검측세포조망;ELISA법검측세포배양상청액중Caspas-3활성;Western blotting법검측조망상관단백세포색소C(Cyt-C)、Bcl-2、Bax화린산화단백격매C(p-Akt)적표체.결과 MIN6세포증식활성수철고동간예농도적승고이하강,정현농도의뢰성.재생리당농도(5.6 mmol/L)화고포도당농도(28 mmol/L)배경중,철고동조적GSIS균현저저우여대조조(P＜0.01),이철고동+길항제조GSIS현저고우철고동조(P＜0.01).철고동조세포조망솔현저고우대조조(P＜0.01),이철고동+길항제조세포조망솔현저저우철고동조(P＜0.01).여대조조비교,철고동조Caspase-3활성명현승고,Cyt-C표체상조,Bcl-2/Bax하강,p-Akt표체하조(균P＜0.01);이철고동+길항제조대철고동조적Caspase-3활성승고급상관단백표체이상구유명현억제작용.결론 철고동구유촉진MIN6세포조망적작용,기작용궤제가능여Cyt-C、Bcl-2、Bax화Akt개도적선립체신호도경유관.
