CAJ | 학술논문

[目的]构建青天葵器官大小调控基因—Erb3结合蛋白(Erb3-binding protein,EBPI)编码基因的原核表达载体,以期为通过原核表达体系鉴定该基因的功能奠定基础.[方法]将引入酶切位点的NfEBP1基因的PCR产物及表达载体pET-28、pET-16b分别进行双酶切,之后连接相应的酶切产物,热击转化到E.coli Top10细胞,通过菌落PCR、测序和酶切筛选阳性重组子.将确认的阳性重组子质粒转化至E.coliBL21表达宿主菌,并对其进行双酶切验证[结果]构建了重组表达质粒pET-28-NfEBP1 -1188和pET-16-NfEBP1-1188,其转化E.coli BL21表达宿主细胞后,分别获得含有2个载体的工程菌.[结论]该研究成功构建了青天葵EBP1基因的原核表达载体,为后续通过原核表达体系鉴定该基因的功能奠定了基础.
[목적]구건청천규기관대소조공기인—Erb3결합단백(Erb3-binding protein,EBPI)편마기인적원핵표체재체,이기위통과원핵표체체계감정해기인적공능전정기출.[방법]장인입매절위점적NfEBP1기인적PCR산물급표체재체pET-28、pET-16b분별진행쌍매절,지후련접상응적매절산물,열격전화도E.coli Top10세포,통과균락PCR、측서화매절사선양성중조자.장학인적양성중조자질립전화지E.coliBL21표체숙주균,병대기진행쌍매절험증[결과]구건료중조표체질립pET-28-NfEBP1 -1188화pET-16-NfEBP1-1188,기전화E.coli BL21표체숙주세포후,분별획득함유2개재체적공정균.[결론]해연구성공구건료청천규EBP1기인적원핵표체재체,위후속통과원핵표체체계감정해기인적공능전정료기출.