中国寄生虫病防治杂志
中國寄生蟲病防治雜誌
중국기생충병방치잡지
CHINESE JOURNAL OF PARASITIC DISEASE CONTROL
2005年
1期
1-4
,共4页
蒋华%何深一%周怀瑜%丛华%古钦民%李瑛%赵群力
蔣華%何深一%週懷瑜%叢華%古欽民%李瑛%趙群力
장화%하심일%주부유%총화%고흠민%리영%조군력
弓形虫%P30%棒状体蛋白2%克隆%基因重组
弓形蟲%P30%棒狀體蛋白2%剋隆%基因重組
궁형충%P30%봉상체단백2%극륭%기인중조
目的构建弓形虫RH株pcDNA3.1-P30-ROP2真核表达重组质粒,为进一步表达及DNA疫苗的研制作准备. 方法用PCR技术从弓形虫RH分离株的基因组DNA中扩增编码 P30基因片段和棒状体蛋白(ROP2)的基因片段,重组入pUC18克隆载体,然后将pUC18-P30-ROP2中的P30-ROP2外源基因片段经酶切、连接等反应,亚克隆入pcDNA3.1真核表达载体,再经含氨苄青霉素的LB培养基筛选、酶切及PCR鉴定. 结果从弓形虫RH株基因组中扩增出特异的P30、ROP2片段,克隆成功pUC18-P30-ROP2重组质粒;经亚克隆、筛选鉴定获得了pcDNA3.1-P30-ROP2重组表达质粒. 结论成功构建了弓形虫pUC18-P30-ROP2重组克隆质粒,亚克隆成功pcDNA3.1-P30-ROP2真核表达重组质粒,为下一步DNA疫苗的研究奠定了基础.
目的構建弓形蟲RH株pcDNA3.1-P30-ROP2真覈錶達重組質粒,為進一步錶達及DNA疫苗的研製作準備. 方法用PCR技術從弓形蟲RH分離株的基因組DNA中擴增編碼 P30基因片段和棒狀體蛋白(ROP2)的基因片段,重組入pUC18剋隆載體,然後將pUC18-P30-ROP2中的P30-ROP2外源基因片段經酶切、連接等反應,亞剋隆入pcDNA3.1真覈錶達載體,再經含氨芐青黴素的LB培養基篩選、酶切及PCR鑒定. 結果從弓形蟲RH株基因組中擴增齣特異的P30、ROP2片段,剋隆成功pUC18-P30-ROP2重組質粒;經亞剋隆、篩選鑒定穫得瞭pcDNA3.1-P30-ROP2重組錶達質粒. 結論成功構建瞭弓形蟲pUC18-P30-ROP2重組剋隆質粒,亞剋隆成功pcDNA3.1-P30-ROP2真覈錶達重組質粒,為下一步DNA疫苗的研究奠定瞭基礎.
목적구건궁형충RH주pcDNA3.1-P30-ROP2진핵표체중조질립,위진일보표체급DNA역묘적연제작준비. 방법용PCR기술종궁형충RH분리주적기인조DNA중확증편마 P30기인편단화봉상체단백(ROP2)적기인편단,중조입pUC18극륭재체,연후장pUC18-P30-ROP2중적P30-ROP2외원기인편단경매절、련접등반응,아극륭입pcDNA3.1진핵표체재체,재경함안변청매소적LB배양기사선、매절급PCR감정. 결과종궁형충RH주기인조중확증출특이적P30、ROP2편단,극륭성공pUC18-P30-ROP2중조질립;경아극륭、사선감정획득료pcDNA3.1-P30-ROP2중조표체질립. 결론성공구건료궁형충pUC18-P30-ROP2중조극륭질립,아극륭성공pcDNA3.1-P30-ROP2진핵표체중조질립,위하일보DNA역묘적연구전정료기출.
