中国兽医科学
中國獸醫科學
중국수의과학
VETERINARY SCIENCE IN CHINA
2006年
7期
547-551
,共5页
李海龙%景志忠%姜悦平%才学鹏
李海龍%景誌忠%薑悅平%纔學鵬
리해룡%경지충%강열평%재학붕
猪囊尾蚴%T24基因%克隆%表达%免疫原性
豬囊尾蚴%T24基因%剋隆%錶達%免疫原性
저낭미유%T24기인%극륭%표체%면역원성
采用RT-PCR方法扩增猪囊尾蚴T24免疫原基因,将扩增产物与pGEM-T easy载体连接,重组质粒经PCR、酶切鉴定后进行测序;构建T24基因的pGEX 4T 1原核表达载体,经IPTG诱导表达后,进行SDS-PAGE、Western-blotting;用所表达的蛋白免疫小鼠,经ELISA检测血清抗体,验证其免疫原性.结果显示,所克隆的T24基因片段长716 bp,含有1个678 bp的开放阅读框,其编码226个氨基酸,与已报道的猪囊虫T24基因核苷酸序列同源性为100%;表达的融合蛋白大小为40 ku,并能被猪囊虫阳性血清识别;免疫小鼠在免疫1周后即可检测到血清抗体,第30 d达到较高水平,表明该融合蛋白具有较好的免疫原性.
採用RT-PCR方法擴增豬囊尾蚴T24免疫原基因,將擴增產物與pGEM-T easy載體連接,重組質粒經PCR、酶切鑒定後進行測序;構建T24基因的pGEX 4T 1原覈錶達載體,經IPTG誘導錶達後,進行SDS-PAGE、Western-blotting;用所錶達的蛋白免疫小鼠,經ELISA檢測血清抗體,驗證其免疫原性.結果顯示,所剋隆的T24基因片段長716 bp,含有1箇678 bp的開放閱讀框,其編碼226箇氨基痠,與已報道的豬囊蟲T24基因覈苷痠序列同源性為100%;錶達的融閤蛋白大小為40 ku,併能被豬囊蟲暘性血清識彆;免疫小鼠在免疫1週後即可檢測到血清抗體,第30 d達到較高水平,錶明該融閤蛋白具有較好的免疫原性.
채용RT-PCR방법확증저낭미유T24면역원기인,장확증산물여pGEM-T easy재체련접,중조질립경PCR、매절감정후진행측서;구건T24기인적pGEX 4T 1원핵표체재체,경IPTG유도표체후,진행SDS-PAGE、Western-blotting;용소표체적단백면역소서,경ELISA검측혈청항체,험증기면역원성.결과현시,소극륭적T24기인편단장716 bp,함유1개678 bp적개방열독광,기편마226개안기산,여이보도적저낭충T24기인핵감산서렬동원성위100%;표체적융합단백대소위40 ku,병능피저낭충양성혈청식별;면역소서재면역1주후즉가검측도혈청항체,제30 d체도교고수평,표명해융합단백구유교호적면역원성.
