园艺学报
園藝學報
완예학보
ACTA HORTICULTURAE SINICA
2007年
1期
59-62
,共4页
汤绍虎%孙敏%廖志华%周启贵%李道高
湯紹虎%孫敏%廖誌華%週啟貴%李道高
탕소호%손민%료지화%주계귀%리도고
梨%根癌农杆菌%Cry1Ac基因%遗传转化
梨%根癌農桿菌%Cry1Ac基因%遺傳轉化
리%근암농간균%Cry1Ac기인%유전전화
以'雪青'梨叶片愈伤组织为外植体,经根癌农杆菌介导将CaMV35S启动子调控下的Cry1Ac 基因导入'雪青'梨.698块愈伤组织和231个Kanr芽与携带表达载体质粒pBX203的根癌农杆菌菌株LBA4404共培养3 d后,转入含50 mg·L-1Kan的筛选培养基培养30 d,15 d转接1次.结果表明,在MS+5 mg·L-16-BA+0.1 mg·L-1IAA筛选培养基中,Kanr芽率为34.24%,在1/2 MS+2 mg·L-1IBA+0.5 mg·L-16-BA+500 mg·L-1AC筛选培养基中,15.58% Kanr芽生根.共获得再生植株32株,经PCR和Southern-blot分析证明,其中4株的基因组已成功导入和整合Cry1Ac基因.
以'雪青'梨葉片愈傷組織為外植體,經根癌農桿菌介導將CaMV35S啟動子調控下的Cry1Ac 基因導入'雪青'梨.698塊愈傷組織和231箇Kanr芽與攜帶錶達載體質粒pBX203的根癌農桿菌菌株LBA4404共培養3 d後,轉入含50 mg·L-1Kan的篩選培養基培養30 d,15 d轉接1次.結果錶明,在MS+5 mg·L-16-BA+0.1 mg·L-1IAA篩選培養基中,Kanr芽率為34.24%,在1/2 MS+2 mg·L-1IBA+0.5 mg·L-16-BA+500 mg·L-1AC篩選培養基中,15.58% Kanr芽生根.共穫得再生植株32株,經PCR和Southern-blot分析證明,其中4株的基因組已成功導入和整閤Cry1Ac基因.
이'설청'리협편유상조직위외식체,경근암농간균개도장CaMV35S계동자조공하적Cry1Ac 기인도입'설청'리.698괴유상조직화231개Kanr아여휴대표체재체질립pBX203적근암농간균균주LBA4404공배양3 d후,전입함50 mg·L-1Kan적사선배양기배양30 d,15 d전접1차.결과표명,재MS+5 mg·L-16-BA+0.1 mg·L-1IAA사선배양기중,Kanr아솔위34.24%,재1/2 MS+2 mg·L-1IBA+0.5 mg·L-16-BA+500 mg·L-1AC사선배양기중,15.58% Kanr아생근.공획득재생식주32주,경PCR화Southern-blot분석증명,기중4주적기인조이성공도입화정합Cry1Ac기인.