营养学报
營養學報
영양학보
ACTA NUTRIMENTA SINICA
2008年
2期
144-147,152
,共5页
张绪梅%黄国伟%姬长珍%张文治%苏心
張緒梅%黃國偉%姬長珍%張文治%囌心
장서매%황국위%희장진%장문치%소심
叶酸%神经干细胞%nestin%BrdU%免疫荧光双标记
葉痠%神經榦細胞%nestin%BrdU%免疫熒光雙標記
협산%신경간세포%nestin%BrdU%면역형광쌍표기
目的 探讨叶酸对体外培养的胚胎大鼠神经干细胞(neural stem cells,NSCs)增殖的影响.方法 本研究采用显微解剖、机械吹打、无血清悬浮培养方法 分离培养鼠胚大脑NSCs,用巢蛋白(nestin)免疫荧光染色对其进行鉴定,5'-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)掺入法检测细胞增殖状态;设立正常对照组,叶酸低、高剂量(培养液中添加叶酸4.0 40 mg/L)和叶酸缺乏组(培养液中添加叶酸拮抗剂甲氨蝶呤0.4 mg/L);通过nestin+BrdU免疫荧光双标记和绘制细胞生长曲线(MTT法)检测叶酸对细胞增殖状态的影响.结果 无血清培养液中可形成大量呈nestin抗原阳性细胞组成的神经球,BrdU免疫标记证实培养的NSCs具有增殖能力.免疫荧光双标记和MTT结果 显示,两个叶酸干预组NSCs增殖能力较对照组显著增强.结论 体外培养的胚胎大鼠NSCs具有增殖和自我更新的能力;叶酸可以在一定程度上增强NSCs的增殖能力,促进神经干细胞的生长.
目的 探討葉痠對體外培養的胚胎大鼠神經榦細胞(neural stem cells,NSCs)增殖的影響.方法 本研究採用顯微解剖、機械吹打、無血清懸浮培養方法 分離培養鼠胚大腦NSCs,用巢蛋白(nestin)免疫熒光染色對其進行鑒定,5'-溴脫氧尿嘧啶(BrdU)摻入法檢測細胞增殖狀態;設立正常對照組,葉痠低、高劑量(培養液中添加葉痠4.0 40 mg/L)和葉痠缺乏組(培養液中添加葉痠拮抗劑甲氨蝶呤0.4 mg/L);通過nestin+BrdU免疫熒光雙標記和繪製細胞生長麯線(MTT法)檢測葉痠對細胞增殖狀態的影響.結果 無血清培養液中可形成大量呈nestin抗原暘性細胞組成的神經毬,BrdU免疫標記證實培養的NSCs具有增殖能力.免疫熒光雙標記和MTT結果 顯示,兩箇葉痠榦預組NSCs增殖能力較對照組顯著增彊.結論 體外培養的胚胎大鼠NSCs具有增殖和自我更新的能力;葉痠可以在一定程度上增彊NSCs的增殖能力,促進神經榦細胞的生長.
목적 탐토협산대체외배양적배태대서신경간세포(neural stem cells,NSCs)증식적영향.방법 본연구채용현미해부、궤계취타、무혈청현부배양방법 분리배양서배대뇌NSCs,용소단백(nestin)면역형광염색대기진행감정,5'-추탈양뇨밀정(BrdU)참입법검측세포증식상태;설립정상대조조,협산저、고제량(배양액중첨가협산4.0 40 mg/L)화협산결핍조(배양액중첨가협산길항제갑안접령0.4 mg/L);통과nestin+BrdU면역형광쌍표기화회제세포생장곡선(MTT법)검측협산대세포증식상태적영향.결과 무혈청배양액중가형성대량정nestin항원양성세포조성적신경구,BrdU면역표기증실배양적NSCs구유증식능력.면역형광쌍표기화MTT결과 현시,량개협산간예조NSCs증식능력교대조조현저증강.결론 체외배양적배태대서NSCs구유증식화자아경신적능력;협산가이재일정정도상증강NSCs적증식능력,촉진신경간세포적생장.
