南京医科大学学报（自然科学版）
南京醫科大學學報（自然科學版）
남경의과대학학보（자연과학판）
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINALIS NANJING
2008年
4期
412-415
,共4页
陈霞%徐闻欢%徐娟%赵聃%王迎伟
陳霞%徐聞歡%徐娟%趙聃%王迎偉
진하%서문환%서연%조담%왕영위
结核杆菌%ESAT-6%T细胞表位%DNA疫苗
結覈桿菌%ESAT-6%T細胞錶位%DNA疫苗
결핵간균%ESAT-6%T세포표위%DNA역묘
目的:构建含3个结核杆菌ESAT-6抗原T细胞表位及Fh3配体基因的重组质粒,并使其在大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)中表达.方法:用计算机软件预测结核杆菌ESAT-6抗原的T细胞表位谱,选取3个T细胞表位,并以Ala-Ala-Tvr(AAY)序列作为接头,合成全基因序列,定向克隆入真核双表达载体pIRES及质粒plRES-FL.在酶切分析与序列测定后.用PEI转染至GMCs细胞,并行Western blot鉴定其体外表达.结果:核酸序列测定证实重组质粒构建正确,Western blot证实该重组质粒能在体外GMCs细胞中表达融合蛋白.结论:成功构建了结核杆菌ESAT-6抗原多表位基因重组质粒.
目的:構建含3箇結覈桿菌ESAT-6抗原T細胞錶位及Fh3配體基因的重組質粒,併使其在大鼠腎小毬繫膜細胞(GMCs)中錶達.方法:用計算機軟件預測結覈桿菌ESAT-6抗原的T細胞錶位譜,選取3箇T細胞錶位,併以Ala-Ala-Tvr(AAY)序列作為接頭,閤成全基因序列,定嚮剋隆入真覈雙錶達載體pIRES及質粒plRES-FL.在酶切分析與序列測定後.用PEI轉染至GMCs細胞,併行Western blot鑒定其體外錶達.結果:覈痠序列測定證實重組質粒構建正確,Western blot證實該重組質粒能在體外GMCs細胞中錶達融閤蛋白.結論:成功構建瞭結覈桿菌ESAT-6抗原多錶位基因重組質粒.
목적:구건함3개결핵간균ESAT-6항원T세포표위급Fh3배체기인적중조질립,병사기재대서신소구계막세포(GMCs)중표체.방법:용계산궤연건예측결핵간균ESAT-6항원적T세포표위보,선취3개T세포표위,병이Ala-Ala-Tvr(AAY)서렬작위접두,합성전기인서렬,정향극륭입진핵쌍표체재체pIRES급질립plRES-FL.재매절분석여서렬측정후.용PEI전염지GMCs세포,병행Western blot감정기체외표체.결과:핵산서렬측정증실중조질립구건정학,Western blot증실해중조질립능재체외GMCs세포중표체융합단백.결론:성공구건료결핵간균ESAT-6항원다표위기인중조질립.
