世界华人消化杂志
世界華人消化雜誌
세계화인소화잡지
WORLD CHINESE JOURNAL OF DIGESTOLOGY
2009年
5期
459-463
,共5页
邵国利%吴爱国%焦得闯%纪术峰
邵國利%吳愛國%焦得闖%紀術峰
소국리%오애국%초득틈%기술봉
c-myc%反义寡核苷酸%反义治疗%HT-29细胞%大肠癌
c-myc%反義寡覈苷痠%反義治療%HT-29細胞%大腸癌
c-myc%반의과핵감산%반의치료%HT-29세포%대장암
目的:研究体外c-myc反义寡核苷酸(ASODN)对人结肠癌HT-29细胞增殖、凋亡及化疗敏感性的影响.方法:利用脂质体LipofectamineTM2000介导将c-myc ASODN转染入大肠癌HT-29细胞中, 逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)、Westernblot方法检测c-myc基因mRNA及蛋白的表达,MTT、流式细胞仪(FCM)检测c-myc ASODN对人结肠癌HT-29细胞增殖抑制及其对奥沙利铂敏感性影响.结果:转染c-myc ASODN后, HT-29细胞内c-myc mRNA水平显著降低(0.464±0.029 vs0.974±0.027, 0.945±0.012, 均P<0.01). 在HT-29细胞中存在分子质量62 kDa的特异性条带, 与c-myc分子质量相符, ASODN组在PVDF膜上的特异性条带明显弱于对照组; MTT结果显示转染c-myc ASODN 48 h后的HT-29细胞的增殖速度较对照组细胞明显减慢. FCM显示c-myc ASODN转染后72 h后, 奥沙利铂+ c-myc ASODN组细胞凋亡率显著高于对照组( P<0.05).结论:体外c-myc ASODN可抑制c-myc mRNA及蛋白的表达, 阻断c-myc可抑制HT-29细胞增殖并增强其对奥沙利铂的敏感性, 可能为大肠癌的基因治疗提供新的靶点.
目的:研究體外c-myc反義寡覈苷痠(ASODN)對人結腸癌HT-29細胞增殖、凋亡及化療敏感性的影響.方法:利用脂質體LipofectamineTM2000介導將c-myc ASODN轉染入大腸癌HT-29細胞中, 逆轉錄多聚酶鏈反應(RT-PCR)、Westernblot方法檢測c-myc基因mRNA及蛋白的錶達,MTT、流式細胞儀(FCM)檢測c-myc ASODN對人結腸癌HT-29細胞增殖抑製及其對奧沙利鉑敏感性影響.結果:轉染c-myc ASODN後, HT-29細胞內c-myc mRNA水平顯著降低(0.464±0.029 vs0.974±0.027, 0.945±0.012, 均P<0.01). 在HT-29細胞中存在分子質量62 kDa的特異性條帶, 與c-myc分子質量相符, ASODN組在PVDF膜上的特異性條帶明顯弱于對照組; MTT結果顯示轉染c-myc ASODN 48 h後的HT-29細胞的增殖速度較對照組細胞明顯減慢. FCM顯示c-myc ASODN轉染後72 h後, 奧沙利鉑+ c-myc ASODN組細胞凋亡率顯著高于對照組( P<0.05).結論:體外c-myc ASODN可抑製c-myc mRNA及蛋白的錶達, 阻斷c-myc可抑製HT-29細胞增殖併增彊其對奧沙利鉑的敏感性, 可能為大腸癌的基因治療提供新的靶點.
목적:연구체외c-myc반의과핵감산(ASODN)대인결장암HT-29세포증식、조망급화료민감성적영향.방법:이용지질체LipofectamineTM2000개도장c-myc ASODN전염입대장암HT-29세포중, 역전록다취매련반응(RT-PCR)、Westernblot방법검측c-myc기인mRNA급단백적표체,MTT、류식세포의(FCM)검측c-myc ASODN대인결장암HT-29세포증식억제급기대오사리박민감성영향.결과:전염c-myc ASODN후, HT-29세포내c-myc mRNA수평현저강저(0.464±0.029 vs0.974±0.027, 0.945±0.012, 균P<0.01). 재HT-29세포중존재분자질량62 kDa적특이성조대, 여c-myc분자질량상부, ASODN조재PVDF막상적특이성조대명현약우대조조; MTT결과현시전염c-myc ASODN 48 h후적HT-29세포적증식속도교대조조세포명현감만. FCM현시c-myc ASODN전염후72 h후, 오사리박+ c-myc ASODN조세포조망솔현저고우대조조( P<0.05).결론:체외c-myc ASODN가억제c-myc mRNA급단백적표체, 조단c-myc가억제HT-29세포증식병증강기대오사리박적민감성, 가능위대장암적기인치료제공신적파점.
