南昌大学学报（理科版）
南昌大學學報（理科版）
남창대학학보（이과판）
JOURNAL OF NANCHANG UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE)
2010年
5期
498-502
,共5页
古菌%二硫键异构酶%嗜热自养甲烷杆菌%纯化%热耐受性
古菌%二硫鍵異構酶%嗜熱自養甲烷桿菌%純化%熱耐受性
고균%이류건이구매%기열자양갑완간균%순화%열내수성
二硫键异构酶(PDI)是1种重要的蛋白折叠酶,它催化蛋白二硫键的形成和错误配对二硫键的重排,并有抑制错误折叠蛋白聚集的分子伴侣活性.为了研究嗜热自养甲烷杆菌二硫键异构酶(mtPDI)的功能,克隆了mtPDI基因的ORF区,构建了融合基因原核表达载体pET-28a(+)-mtPDI.将质粒pET-28a(+)-mtPDI和pSJS1240共转化E.coli BL21(DE3)构建E.coli(pSJS1240,pET-28a-mtPDI)过表达系统,实现了融合蛋白的高效表达.另外,进行了mtPDI对大肠杆菌的热耐受性研究,E.coli(pET-28a-mtPDI)在30℃和IPTG诱导30 min后,在51℃热刺激60 min后能够提高E.coli的生存率.这一结果表明mtPDI在热损伤保护中具有关键性作用.上述实验结果为嗜热自养甲烷杆菌的二硫键异构酶的抗胁迫机制的深入研究奠定了基础.
二硫鍵異構酶(PDI)是1種重要的蛋白摺疊酶,它催化蛋白二硫鍵的形成和錯誤配對二硫鍵的重排,併有抑製錯誤摺疊蛋白聚集的分子伴侶活性.為瞭研究嗜熱自養甲烷桿菌二硫鍵異構酶(mtPDI)的功能,剋隆瞭mtPDI基因的ORF區,構建瞭融閤基因原覈錶達載體pET-28a(+)-mtPDI.將質粒pET-28a(+)-mtPDI和pSJS1240共轉化E.coli BL21(DE3)構建E.coli(pSJS1240,pET-28a-mtPDI)過錶達繫統,實現瞭融閤蛋白的高效錶達.另外,進行瞭mtPDI對大腸桿菌的熱耐受性研究,E.coli(pET-28a-mtPDI)在30℃和IPTG誘導30 min後,在51℃熱刺激60 min後能夠提高E.coli的生存率.這一結果錶明mtPDI在熱損傷保護中具有關鍵性作用.上述實驗結果為嗜熱自養甲烷桿菌的二硫鍵異構酶的抗脅迫機製的深入研究奠定瞭基礎.
이류건이구매(PDI)시1충중요적단백절첩매,타최화단백이류건적형성화착오배대이류건적중배,병유억제착오절첩단백취집적분자반려활성.위료연구기열자양갑완간균이류건이구매(mtPDI)적공능,극륭료mtPDI기인적ORF구,구건료융합기인원핵표체재체pET-28a(+)-mtPDI.장질립pET-28a(+)-mtPDI화pSJS1240공전화E.coli BL21(DE3)구건E.coli(pSJS1240,pET-28a-mtPDI)과표체계통,실현료융합단백적고효표체.령외,진행료mtPDI대대장간균적열내수성연구,E.coli(pET-28a-mtPDI)재30℃화IPTG유도30 min후,재51℃열자격60 min후능구제고E.coli적생존솔.저일결과표명mtPDI재열손상보호중구유관건성작용.상술실험결과위기열자양갑완간균적이류건이구매적항협박궤제적심입연구전정료기출.
