生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2010年
12期
132-136
,共5页
代小梅%程晓霞%曾会明%韩烈保
代小梅%程曉霞%曾會明%韓烈保
대소매%정효하%증회명%한렬보
日本结缕草%总RNA%mRNA分离
日本結縷草%總RNA%mRNA分離
일본결루초%총RNA%mRNA분리
介绍了分别以日本结缕草根部、叶部、匍匐茎等为材料的总RNA提取的改良步骤,质量和浓度检测及其注意事项,并采用Promega公司的Poly A Tract SystemsⅢ(Z5300)试剂盒进行mRNA分离,尽管这一方法成熟可行,但仍存在洗脱体积较大,常需先沉淀浓缩后才能进行后续试验(如cDNA合成),在制备少量mRNA时回收率较低等问题.据此,对mRNA分离方法作了改良,介绍了mRNA分离的优化步骤,通过增加体系形成了一种更适合于日本结缕草mRNA分离的方法,从而为日本结缕草的分子生物学研究提供基础资料.结果证明所提取的总RNA和mRNA完整,质量较高,并应用到日本结缕草cDNA文库的构建.
介紹瞭分彆以日本結縷草根部、葉部、匍匐莖等為材料的總RNA提取的改良步驟,質量和濃度檢測及其註意事項,併採用Promega公司的Poly A Tract SystemsⅢ(Z5300)試劑盒進行mRNA分離,儘管這一方法成熟可行,但仍存在洗脫體積較大,常需先沉澱濃縮後纔能進行後續試驗(如cDNA閤成),在製備少量mRNA時迴收率較低等問題.據此,對mRNA分離方法作瞭改良,介紹瞭mRNA分離的優化步驟,通過增加體繫形成瞭一種更適閤于日本結縷草mRNA分離的方法,從而為日本結縷草的分子生物學研究提供基礎資料.結果證明所提取的總RNA和mRNA完整,質量較高,併應用到日本結縷草cDNA文庫的構建.
개소료분별이일본결루초근부、협부、포복경등위재료적총RNA제취적개량보취,질량화농도검측급기주의사항,병채용Promega공사적Poly A Tract SystemsⅢ(Z5300)시제합진행mRNA분리,진관저일방법성숙가행,단잉존재세탈체적교대,상수선침정농축후재능진행후속시험(여cDNA합성),재제비소량mRNA시회수솔교저등문제.거차,대mRNA분리방법작료개량,개소료mRNA분리적우화보취,통과증가체계형성료일충경괄합우일본결루초mRNA분리적방법,종이위일본결루초적분자생물학연구제공기출자료.결과증명소제취적총RNA화mRNA완정,질량교고,병응용도일본결루초cDNA문고적구건.
