热带作物学报
熱帶作物學報
열대작물학보
CHINESE JOURNAL OF TROPICAL CROPS
2011年
11期
2088-2093
,共6页
姜翠翠%陈桂信%潘东明%吕恃衡
薑翠翠%陳桂信%潘東明%呂恃衡
강취취%진계신%반동명%려시형
(捺)%花青素合成酶%克隆%原核表达
(捺)%花青素閤成酶%剋隆%原覈錶達
(날)%화청소합성매%극륭%원핵표체
根据NCBI数据库中已知的蔷薇科植物花青素合成酶基因序列设计特异引物,从本实验室已经构建好的(捺)成熟果实均一化全长cDNA文库中筛选分离得到了一个编码花青素合成酶的cDNA:基因命名为PsA NS,登录号:JN560957.该cDNA长1 478 bp,包含137 bp 5′非编码区,267 bp 3′非编码区,开放阅读框长度为1 074 bp.PsA NS编码358个氨基酸,分子量为40.41 ku,理论等电点为5.35.经BLAST分析对比发现,PsA NS氨基酸序列与甜樱桃、苹果和草莓的ANS氨基酸同源性都很高,分别为98%、93%和89%.将PsA NS亚克隆到原核表达载体pGEX-6P-1和pET-32a上,在大肠杆菌BL21中经1mmol/LITPG诱导表达获得了(捺)PsA NS融合表达蛋白,其分子量大小与预期的一致,进一步确认本试验克隆得到的PsA NS为(捺)花青素合成酶基因.
根據NCBI數據庫中已知的薔薇科植物花青素閤成酶基因序列設計特異引物,從本實驗室已經構建好的(捺)成熟果實均一化全長cDNA文庫中篩選分離得到瞭一箇編碼花青素閤成酶的cDNA:基因命名為PsA NS,登錄號:JN560957.該cDNA長1 478 bp,包含137 bp 5′非編碼區,267 bp 3′非編碼區,開放閱讀框長度為1 074 bp.PsA NS編碼358箇氨基痠,分子量為40.41 ku,理論等電點為5.35.經BLAST分析對比髮現,PsA NS氨基痠序列與甜櫻桃、蘋果和草莓的ANS氨基痠同源性都很高,分彆為98%、93%和89%.將PsA NS亞剋隆到原覈錶達載體pGEX-6P-1和pET-32a上,在大腸桿菌BL21中經1mmol/LITPG誘導錶達穫得瞭(捺)PsA NS融閤錶達蛋白,其分子量大小與預期的一緻,進一步確認本試驗剋隆得到的PsA NS為(捺)花青素閤成酶基因.
근거NCBI수거고중이지적장미과식물화청소합성매기인서렬설계특이인물,종본실험실이경구건호적(날)성숙과실균일화전장cDNA문고중사선분리득도료일개편마화청소합성매적cDNA:기인명명위PsA NS,등록호:JN560957.해cDNA장1 478 bp,포함137 bp 5′비편마구,267 bp 3′비편마구,개방열독광장도위1 074 bp.PsA NS편마358개안기산,분자량위40.41 ku,이론등전점위5.35.경BLAST분석대비발현,PsA NS안기산서렬여첨앵도、평과화초매적ANS안기산동원성도흔고,분별위98%、93%화89%.장PsA NS아극륭도원핵표체재체pGEX-6P-1화pET-32a상,재대장간균BL21중경1mmol/LITPG유도표체획득료(날)PsA NS융합표체단백,기분자량대소여예기적일치,진일보학인본시험극륭득도적PsA NS위(날)화청소합성매기인.