CAJ | 학술논문

建立了氨基酸同位素稀释液相色谱-串联质谱法准确测定合成肽段绝对含量的方法.实验中对合成肽段的纯度进行了表征,色谱纯度表征结果为99％以上,质谱纯度为90％以上.在肽段溶液中加入13C标记的氨基酸后进行酸溶液水解时间的优化,水解后的氨基酸直接经液相色谱分离和质谱检测,结果表明肽段中的被测氨基酸在150℃、6 mol/L HC1溶液水解4～6h就可以达到水解平衡.每个肽段选择两个或两个以上的被测氨基酸,测得随机选择的5种合成肽段的绝对含量为62.07％～ 88.18％,测定结果的相对标准偏差小于8％,相对误差小于5％,均满足定量要求.除常用的被测氨基酸苯丙氨酸、缬氨酸、异亮氨酸外,还考察了选择赖氨酸和精氨酸作为被测氨基酸的可行性,实验结果表明增加精氨酸为被测氨基酸是可行的,从而进一步增加了方法的普适性.该方法的建立避免了色谱法定量时氨基酸衍生化处理带来的副反应影响及操作繁琐等问题,提高了肽段含量测定的准确度和精密度,为肽段含量的准确测定提供了一种新的方法.
건립료안기산동위소희석액상색보-천련질보법준학측정합성태단절대함량적방법.실험중대합성태단적순도진행료표정,색보순도표정결과위99％이상,질보순도위90％이상.재태단용액중가입13C표기적안기산후진행산용액수해시간적우화,수해후적안기산직접경액상색보분리화질보검측,결과표명태단중적피측안기산재150℃、6 mol/L HC1용액수해4～6h취가이체도수해평형.매개태단선택량개혹량개이상적피측안기산,측득수궤선택적5충합성태단적절대함량위62.07％～ 88.18％,측정결과적상대표준편차소우8％,상대오차소우5％,균만족정량요구.제상용적피측안기산분병안산、힐안산、이량안산외,환고찰료선택뢰안산화정안산작위피측안기산적가행성,실험결과표명증가정안산위피측안기산시가행적,종이진일보증가료방법적보괄성.해방법적건립피면료색보법정량시안기산연생화처리대래적부반응영향급조작번쇄등문제,제고료태단함량측정적준학도화정밀도,위태단함량적준학측정제공료일충신적방법.