江苏农业科学
江囌農業科學
강소농업과학
JIANGSU AGRICULTURAL SCIENCES
2012年
4期
19-26
,共8页
谢正露%沈学怀%殷复建%刘琳%马海田%范红结
謝正露%瀋學懷%慇複建%劉琳%馬海田%範紅結
사정로%침학부%은복건%류림%마해전%범홍결
C57BL/6小鼠%猪链球菌2型%抑制性消减杂交%差异表达基因%消减cDNA文库
C57BL/6小鼠%豬鏈毬菌2型%抑製性消減雜交%差異錶達基因%消減cDNA文庫
C57BL/6소서%저련구균2형%억제성소감잡교%차이표체기인%소감cDNA문고
探讨C57BL/6品系小鼠体内猪链球菌2型感染后的差异表达基因,以期为进一步研究猪链球菌的致病机制和抗病性研究提供重要的参考依据.利用抑制性消减杂交技术构建了8周龄C57BL/6小鼠感染猪链球菌2型后的脾脏消减cDNA文库.对获得的237个阳性克隆进行测序,利用GenBank BLAST分析核酸和蛋白质同源性,共获得159条差异表达序列标签(ESTs).试验结果证实,正向文库有34个、反向文库有30个不同的基因与ESTs具有高度的同源性,它们分别是免疫性能、细胞组分、细胞信号分子、转录因子等的重要功能基因产物.经抑制消减杂交筛选出的差异表达基因主要有免疫球蛋白IgM重链-6、胸腺素4- beta、磷酸酶张力结合蛋白、转磷酸胆碱酶、肽酰-脯氨酰-顺反式异构酶、磷脂酰丝氨酸脱羧酶、胰岛素样生长因子结合蛋白-3等基因.筛选到较多EST与抗病性相关的重要基因具有很高的同源性,且这些基因在猪链球菌2型感染后的表达具有显著差异,提示这些基因在猪链球菌2型感染过程中发挥着重要功能.
探討C57BL/6品繫小鼠體內豬鏈毬菌2型感染後的差異錶達基因,以期為進一步研究豬鏈毬菌的緻病機製和抗病性研究提供重要的參攷依據.利用抑製性消減雜交技術構建瞭8週齡C57BL/6小鼠感染豬鏈毬菌2型後的脾髒消減cDNA文庫.對穫得的237箇暘性剋隆進行測序,利用GenBank BLAST分析覈痠和蛋白質同源性,共穫得159條差異錶達序列標籤(ESTs).試驗結果證實,正嚮文庫有34箇、反嚮文庫有30箇不同的基因與ESTs具有高度的同源性,它們分彆是免疫性能、細胞組分、細胞信號分子、轉錄因子等的重要功能基因產物.經抑製消減雜交篩選齣的差異錶達基因主要有免疫毬蛋白IgM重鏈-6、胸腺素4- beta、燐痠酶張力結閤蛋白、轉燐痠膽堿酶、肽酰-脯氨酰-順反式異構酶、燐脂酰絲氨痠脫羧酶、胰島素樣生長因子結閤蛋白-3等基因.篩選到較多EST與抗病性相關的重要基因具有很高的同源性,且這些基因在豬鏈毬菌2型感染後的錶達具有顯著差異,提示這些基因在豬鏈毬菌2型感染過程中髮揮著重要功能.
탐토C57BL/6품계소서체내저련구균2형감염후적차이표체기인,이기위진일보연구저련구균적치병궤제화항병성연구제공중요적삼고의거.이용억제성소감잡교기술구건료8주령C57BL/6소서감염저련구균2형후적비장소감cDNA문고.대획득적237개양성극륭진행측서,이용GenBank BLAST분석핵산화단백질동원성,공획득159조차이표체서렬표첨(ESTs).시험결과증실,정향문고유34개、반향문고유30개불동적기인여ESTs구유고도적동원성,타문분별시면역성능、세포조분、세포신호분자、전록인자등적중요공능기인산물.경억제소감잡교사선출적차이표체기인주요유면역구단백IgM중련-6、흉선소4- beta、린산매장력결합단백、전린산담감매、태선-포안선-순반식이구매、린지선사안산탈최매、이도소양생장인자결합단백-3등기인.사선도교다EST여항병성상관적중요기인구유흔고적동원성,차저사기인재저련구균2형감염후적표체구유현저차이,제시저사기인재저련구균2형감염과정중발휘착중요공능.