南京农业大学学报
南京農業大學學報
남경농업대학학보
JOURNAL OF NANJING AGRICULTURAL UNIVERSITY
2012年
4期
1-7
,共7页
邓康胜%吕远大%陶涛%田亮亮%郭旺珍%周宝良%张天真
鄧康勝%呂遠大%陶濤%田亮亮%郭旺珍%週寶良%張天真
산강성%려원대%도도%전량량%곽왕진%주보량%장천진
棉花%EcoTILLING%单核苷酸多态性%CEL Ⅰ酶
棉花%EcoTILLING%單覈苷痠多態性%CEL Ⅰ酶
면화%EcoTILLING%단핵감산다태성%CEL Ⅰ매
以棉花纤维发育相关基因GhSUS1为目标基因,从EcoTILLING技术中常用的关键酶CEL Ⅰ的提取、活性检测、目标基因引物设计及酶切等方面入手,开展了棉花EcoTILLING技术体系的创建研究.结果表明:所提取的CEL Ⅰ活性高,稳定性好.在42℃、酶切体系为8μLPCR扩增产物中加入2μL粗酶液,与缓冲液等量混合,酶切45min,能有效地对单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)所在的异源双链错配位点进行酶切.对棉花GhSUS1基因设计A和D染色体亚组特异性引物进行等位基因的多态性分析,结果表明:EcoTILLING结果与测序结果一致,说明建立的基于PAGE的EcoTILLING技术体系稳定可靠,可用于棉花复等位基因发掘研究.
以棉花纖維髮育相關基因GhSUS1為目標基因,從EcoTILLING技術中常用的關鍵酶CEL Ⅰ的提取、活性檢測、目標基因引物設計及酶切等方麵入手,開展瞭棉花EcoTILLING技術體繫的創建研究.結果錶明:所提取的CEL Ⅰ活性高,穩定性好.在42℃、酶切體繫為8μLPCR擴增產物中加入2μL粗酶液,與緩遲液等量混閤,酶切45min,能有效地對單覈苷痠多態性(single nucleotide polymorphism,SNP)所在的異源雙鏈錯配位點進行酶切.對棉花GhSUS1基因設計A和D染色體亞組特異性引物進行等位基因的多態性分析,結果錶明:EcoTILLING結果與測序結果一緻,說明建立的基于PAGE的EcoTILLING技術體繫穩定可靠,可用于棉花複等位基因髮掘研究.
이면화섬유발육상관기인GhSUS1위목표기인,종EcoTILLING기술중상용적관건매CEL Ⅰ적제취、활성검측、목표기인인물설계급매절등방면입수,개전료면화EcoTILLING기술체계적창건연구.결과표명:소제취적CEL Ⅰ활성고,은정성호.재42℃、매절체계위8μLPCR확증산물중가입2μL조매액,여완충액등량혼합,매절45min,능유효지대단핵감산다태성(single nucleotide polymorphism,SNP)소재적이원쌍련착배위점진행매절.대면화GhSUS1기인설계A화D염색체아조특이성인물진행등위기인적다태성분석,결과표명:EcoTILLING결과여측서결과일치,설명건립적기우PAGE적EcoTILLING기술체계은정가고,가용우면화복등위기인발굴연구.
