中华肿瘤杂志
中華腫瘤雜誌
중화종류잡지
CHINESE JOURNAL OF ONCOLOGY
2006年
10期
724-727
,共4页
李刚%李湘平%刘雄%彭英%林李家宓
李剛%李湘平%劉雄%彭英%林李傢宓
리강%리상평%류웅%팽영%림리가복
DNA载体%RNA干扰%LMP-1基因%鼻咽癌%肿瘤细胞转移
DNA載體%RNA榦擾%LMP-1基因%鼻嚥癌%腫瘤細胞轉移
DNA재체%RNA간우%LMP-1기인%비인암%종류세포전이
目的 探讨应用DNA载体介导RNA干扰技术,抑制鼻咽癌细胞中EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP-1)表达的可能性,观察LMP-1基因沉默对鼻咽癌细胞转移能力的影响.方法 将能转录出干扰RNA的DNA模板插入pAVU6+27质粒,构建能够介导RNA干扰的发夹状干扰RNA(shRNA)表达载体.采用磷酸钙共沉淀法,将质粒导入EB病毒(+)的鼻咽癌细胞C611,筛选LMP-1基因沉默的克隆,通过观察其贴壁生长能力、基底膜穿透能力和移动能力的变化,分析LMP-1基因沉默对鼻咽癌细胞转移能力的影响.结果 在shRNA表达载体有效转染的C611细胞中,LMP-1基因的表达受到稳定抑制.肿瘤细胞转移实验表明,LMP-1基因沉默的C611细胞,贴壁生长能力提高,基底膜穿透能力和细胞移动能力均明显下降.结论 shRNA表达载体能够在鼻咽癌细胞内介导RNA干扰,并获得对LMP-1基因稳定的抑制.LMP-1基因可能通过贴壁生长能力、基底膜穿透能力和细胞移动能力等,影响鼻咽癌细胞的转移.
目的 探討應用DNA載體介導RNA榦擾技術,抑製鼻嚥癌細胞中EB病毒潛伏膜蛋白1(LMP-1)錶達的可能性,觀察LMP-1基因沉默對鼻嚥癌細胞轉移能力的影響.方法 將能轉錄齣榦擾RNA的DNA模闆插入pAVU6+27質粒,構建能夠介導RNA榦擾的髮夾狀榦擾RNA(shRNA)錶達載體.採用燐痠鈣共沉澱法,將質粒導入EB病毒(+)的鼻嚥癌細胞C611,篩選LMP-1基因沉默的剋隆,通過觀察其貼壁生長能力、基底膜穿透能力和移動能力的變化,分析LMP-1基因沉默對鼻嚥癌細胞轉移能力的影響.結果 在shRNA錶達載體有效轉染的C611細胞中,LMP-1基因的錶達受到穩定抑製.腫瘤細胞轉移實驗錶明,LMP-1基因沉默的C611細胞,貼壁生長能力提高,基底膜穿透能力和細胞移動能力均明顯下降.結論 shRNA錶達載體能夠在鼻嚥癌細胞內介導RNA榦擾,併穫得對LMP-1基因穩定的抑製.LMP-1基因可能通過貼壁生長能力、基底膜穿透能力和細胞移動能力等,影響鼻嚥癌細胞的轉移.
목적 탐토응용DNA재체개도RNA간우기술,억제비인암세포중EB병독잠복막단백1(LMP-1)표체적가능성,관찰LMP-1기인침묵대비인암세포전이능력적영향.방법 장능전록출간우RNA적DNA모판삽입pAVU6+27질립,구건능구개도RNA간우적발협상간우RNA(shRNA)표체재체.채용린산개공침정법,장질립도입EB병독(+)적비인암세포C611,사선LMP-1기인침묵적극륭,통과관찰기첩벽생장능력、기저막천투능력화이동능력적변화,분석LMP-1기인침묵대비인암세포전이능력적영향.결과 재shRNA표체재체유효전염적C611세포중,LMP-1기인적표체수도은정억제.종류세포전이실험표명,LMP-1기인침묵적C611세포,첩벽생장능력제고,기저막천투능력화세포이동능력균명현하강.결론 shRNA표체재체능구재비인암세포내개도RNA간우,병획득대LMP-1기인은정적억제.LMP-1기인가능통과첩벽생장능력、기저막천투능력화세포이동능력등,영향비인암세포적전이.