农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2005年
6期
743-746
,共4页
fbps基因%猪链球菌2型%克隆%融合表达
fbps基因%豬鏈毬菌2型%剋隆%融閤錶達
fbps기인%저련구균2형%극륭%융합표체
采用发表的引物对,以猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2)江苏分离株HA9801的基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增纤连蛋白/血纤蛋白原结合蛋白基因fbps(GenBank登录号为AY565303)克隆于pMD-T18载体构建成载体pMD-T-fbps.经内切酶酶切和测序鉴定后,将由pMD-T-fbps内切酶切下的片段定向克隆于表达载体pET-32a(+),得到重组质粒pfbps.将重组质粒pfbps转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21株,经IPTG诱导,可高水平地表达相对分子量为83 kD的融合蛋白.配体印迹结合试验表明,表达的融合蛋白可与人纤连蛋白结合.
採用髮錶的引物對,以豬鏈毬菌2型(Streptococcus suis type 2)江囌分離株HA9801的基因組DNA為模闆,採用PCR方法擴增纖連蛋白/血纖蛋白原結閤蛋白基因fbps(GenBank登錄號為AY565303)剋隆于pMD-T18載體構建成載體pMD-T-fbps.經內切酶酶切和測序鑒定後,將由pMD-T-fbps內切酶切下的片段定嚮剋隆于錶達載體pET-32a(+),得到重組質粒pfbps.將重組質粒pfbps轉化大腸桿菌(Escherichia coli)BL21株,經IPTG誘導,可高水平地錶達相對分子量為83 kD的融閤蛋白.配體印跡結閤試驗錶明,錶達的融閤蛋白可與人纖連蛋白結閤.
채용발표적인물대,이저련구균2형(Streptococcus suis type 2)강소분리주HA9801적기인조DNA위모판,채용PCR방법확증섬련단백/혈섬단백원결합단백기인fbps(GenBank등록호위AY565303)극륭우pMD-T18재체구건성재체pMD-T-fbps.경내절매매절화측서감정후,장유pMD-T-fbps내절매절하적편단정향극륭우표체재체pET-32a(+),득도중조질립pfbps.장중조질립pfbps전화대장간균(Escherichia coli)BL21주,경IPTG유도,가고수평지표체상대분자량위83 kD적융합단백.배체인적결합시험표명,표체적융합단백가여인섬련단백결합.
