计算机与应用化学
計算機與應用化學
계산궤여응용화학
COMPUTERS AND APPLIED CHEMISTRY
2007年
1期
11-15
,共5页
等电聚焦电泳%理论模拟%综述
等電聚焦電泳%理論模擬%綜述
등전취초전영%이론모의%종술
等电聚焦电泳(IEF)是一种在一个pH梯度内操作的特殊电泳.IEF是表征蛋白质电荷不均一性的强有力工具.在一个pH梯度内,酸碱两性物(例如蛋白质)在电场的作用下会被分离,并最后在pH梯度内pH值与两性物等电点(pI)值相等的地方被聚焦成很窄的区段.IEF的分辨率在所有基于电荷的分离技术中是最高的.薄层凝胶IEF从它在上世纪70年代初被发明的时间起就成为在生物实验室被广泛应用的分析技术.但薄层凝胶IEF的主要问题是不能做定量分析,全靠手工操作及分析速度低.当毛细管IEF(cIEF)在1985年被报道时,科学家们就都立即认为cIEF能够克服IEF所有的问题.虽然cIEF看起来有很多优势,但是20多年后的今天它并没有被生物实验室广泛接受为薄层凝胶IEF的替代技术.究其原因是使用通用毛细电泳仪器的cIEF在操作上有很多困难.这种技术在IEF过程后还需要一个额外的移动过程来把聚在毛细管分离柱内的蛋白质区段推到检测器的检测点.这是由于这些毛细电泳仪器都是使用单点检测器.检测点都是靠近毛细管的一端.这个移动过程破坏IEF的高分辨率,降低重现性并使得分析速度变慢,造成在方法的优化上耗很多时间.全柱检测cIEF是在1992年提出的.该技术结合了凝胶IEF及毛细管分离的全部优点;如定量和自动化.它的分离速度大大提高.本文简单综述cIEF对不同生物实验室样品的应用.这些样品包括单克隆抗体,重组蛋白质,蛋白质复合物及失活病毒.最后,本文简述cIEF理论模拟计算的新进展.
等電聚焦電泳(IEF)是一種在一箇pH梯度內操作的特殊電泳.IEF是錶徵蛋白質電荷不均一性的彊有力工具.在一箇pH梯度內,痠堿兩性物(例如蛋白質)在電場的作用下會被分離,併最後在pH梯度內pH值與兩性物等電點(pI)值相等的地方被聚焦成很窄的區段.IEF的分辨率在所有基于電荷的分離技術中是最高的.薄層凝膠IEF從它在上世紀70年代初被髮明的時間起就成為在生物實驗室被廣汎應用的分析技術.但薄層凝膠IEF的主要問題是不能做定量分析,全靠手工操作及分析速度低.噹毛細管IEF(cIEF)在1985年被報道時,科學傢們就都立即認為cIEF能夠剋服IEF所有的問題.雖然cIEF看起來有很多優勢,但是20多年後的今天它併沒有被生物實驗室廣汎接受為薄層凝膠IEF的替代技術.究其原因是使用通用毛細電泳儀器的cIEF在操作上有很多睏難.這種技術在IEF過程後還需要一箇額外的移動過程來把聚在毛細管分離柱內的蛋白質區段推到檢測器的檢測點.這是由于這些毛細電泳儀器都是使用單點檢測器.檢測點都是靠近毛細管的一耑.這箇移動過程破壞IEF的高分辨率,降低重現性併使得分析速度變慢,造成在方法的優化上耗很多時間.全柱檢測cIEF是在1992年提齣的.該技術結閤瞭凝膠IEF及毛細管分離的全部優點;如定量和自動化.它的分離速度大大提高.本文簡單綜述cIEF對不同生物實驗室樣品的應用.這些樣品包括單剋隆抗體,重組蛋白質,蛋白質複閤物及失活病毒.最後,本文簡述cIEF理論模擬計算的新進展.
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