CAJ | 학술논문

[目的]为构建狗脊蕨叶cDNA 文库,保存珍贵基因资源,克隆和研究与有效成分合成相关的基因等提供技术参考.[方法]以狗脊蕨叶片为材料,采用CTAB法、一步法、酚-SDS法和RNA试剂盒提取分离法提取总RNA,通过比较分析确定最优方法.[结果]这4种方法都能提取出18、28 S的RNA,但CTAB法和试剂盒提取分离法的总RNA质量较高,CTAB法还提取出清晰的5S RNA.一步法和SDS法带型模糊,有降解现象.CTAB法提取的狗脊蕨叶片总RNA 质量较好,28S、18S和5S条带清晰,且无明显降解.CTAB提取法OD260/OD280的值在1.93～2.06,试验中其OD260/OD280值为2.012,接近 2.0,纯度较高.一步法和SDS法OD260/OD280＞2.0,试剂盒法OD260/OD280＜2.0.[结论]CTAB法适合提取的狗脊蕨叶片总RNA,质量较好,可用于cDNA合成、文库构建等后续分子生物学试验.
[목적]위구건구척궐협cDNA 문고,보존진귀기인자원,극륭화연구여유효성분합성상관적기인등제공기술삼고.[방법]이구척궐협편위재료,채용CTAB법、일보법、분-SDS법화RNA시제합제취분리법제취총RNA,통과비교분석학정최우방법.[결과]저4충방법도능제취출18、28 S적RNA,단CTAB법화시제합제취분리법적총RNA질량교고,CTAB법환제취출청석적5S RNA.일보법화SDS법대형모호,유강해현상.CTAB법제취적구척궐협편총RNA 질량교호,28S、18S화5S조대청석,차무명현강해.CTAB제취법OD260/OD280적치재1.93～2.06,시험중기OD260/OD280치위2.012,접근 2.0,순도교고.일보법화SDS법OD260/OD280＞2.0,시제합법OD260/OD280＜2.0.[결론]CTAB법괄합제취적구척궐협편총RNA,질량교호,가용우cDNA합성、문고구건등후속분자생물학시험.