海洋学报(中文版)
海洋學報(中文版)
해양학보(중문판)
ACTA OCEANOLOGICA SINICA
2008年
4期
131-138
,共8页
大黄鱼%细胞色素 P450%CYP4F7%克隆%表达分析
大黃魚%細胞色素 P450%CYP4F7%剋隆%錶達分析
대황어%세포색소 P450%CYP4F7%극륭%표체분석
CYP4F7是细胞色素P450超基因家族中CYP4F亚家族中的同工酶之一,而细胞色素P450在通过电子传递参与生物体代谢和转化内源和外源化合物方面起着重要的作用.以本实验室构建的大黄鱼消减杂交cDNA文库中623 bp的CYP4F7片段设计引物,以大黄鱼的总RNA为模板,利用RACE-PCR的方法,克隆鉴定出了大黄鱼细胞色素P450 CYP4F7基因.结果表明:基因全长1934 bp,5′端非编码区59 bp,3′端非编码区264 bp,开放阅读框1 611 bp,编码536个氨基酸.序列分析表明大黄鱼的CYP4F7氨基酸序列与舌齿鲈的相似性为91%.利用RT-PCR方法研究CYP4F7在大黄鱼各组织中的表达特征,结果表明CYP4F7在肝脏、脾脏中表达量最高,在心脏、肾脏、头肾、鳃丝中表达量次之.另外,CYP4F7在注射了细菌脂多糖的大黄鱼各组织中的表达量均低于正常的大黄鱼,认为细菌脂多糖可能是CYP4F7表达的抑制剂,说明CYP4F7可能与鱼类免疫反应有一定相关性.
CYP4F7是細胞色素P450超基因傢族中CYP4F亞傢族中的同工酶之一,而細胞色素P450在通過電子傳遞參與生物體代謝和轉化內源和外源化閤物方麵起著重要的作用.以本實驗室構建的大黃魚消減雜交cDNA文庫中623 bp的CYP4F7片段設計引物,以大黃魚的總RNA為模闆,利用RACE-PCR的方法,剋隆鑒定齣瞭大黃魚細胞色素P450 CYP4F7基因.結果錶明:基因全長1934 bp,5′耑非編碼區59 bp,3′耑非編碼區264 bp,開放閱讀框1 611 bp,編碼536箇氨基痠.序列分析錶明大黃魚的CYP4F7氨基痠序列與舌齒鱸的相似性為91%.利用RT-PCR方法研究CYP4F7在大黃魚各組織中的錶達特徵,結果錶明CYP4F7在肝髒、脾髒中錶達量最高,在心髒、腎髒、頭腎、鰓絲中錶達量次之.另外,CYP4F7在註射瞭細菌脂多糖的大黃魚各組織中的錶達量均低于正常的大黃魚,認為細菌脂多糖可能是CYP4F7錶達的抑製劑,說明CYP4F7可能與魚類免疫反應有一定相關性.
CYP4F7시세포색소P450초기인가족중CYP4F아가족중적동공매지일,이세포색소P450재통과전자전체삼여생물체대사화전화내원화외원화합물방면기착중요적작용.이본실험실구건적대황어소감잡교cDNA문고중623 bp적CYP4F7편단설계인물,이대황어적총RNA위모판,이용RACE-PCR적방법,극륭감정출료대황어세포색소P450 CYP4F7기인.결과표명:기인전장1934 bp,5′단비편마구59 bp,3′단비편마구264 bp,개방열독광1 611 bp,편마536개안기산.서렬분석표명대황어적CYP4F7안기산서렬여설치로적상사성위91%.이용RT-PCR방법연구CYP4F7재대황어각조직중적표체특정,결과표명CYP4F7재간장、비장중표체량최고,재심장、신장、두신、새사중표체량차지.령외,CYP4F7재주사료세균지다당적대황어각조직중적표체량균저우정상적대황어,인위세균지다당가능시CYP4F7표체적억제제,설명CYP4F7가능여어류면역반응유일정상관성.
