世界华人消化杂志
世界華人消化雜誌
세계화인소화잡지
WORLD CHINESE JOURNAL OF DIGESTOLOGY
2008年
22期
2464-2469
,共6页
骨髓%间充质干细胞%类肝细胞%大鼠%放射免疫法%免疫细胞化学%肝细胞生长因子%成纤维细胞生长因子
骨髓%間充質榦細胞%類肝細胞%大鼠%放射免疫法%免疫細胞化學%肝細胞生長因子%成纖維細胞生長因子
골수%간충질간세포%류간세포%대서%방사면역법%면역세포화학%간세포생장인자%성섬유세포생장인자
目的:观察不同条件下骨髓间充质干细胞(MSCs)体外诱导分化为类肝细胞的差异.方法:Wistar大鼠24只随机均分为3组,分别为正常对照组、肝纤维化模型组、自拟中药干预组.采用CCl4乳剂皮下注射建立肝纤维化模型.造模成功后中药干预组采用丹金舒肝胶囊药液灌胃治疗.治疗结束后剖杀大鼠,留取大鼠肝脏标本,HE染色观察各组病理改变.采用密度梯度离心法和贴壁法分离各组大鼠的MSCs,经培养传代获得纯化的MSCs.各组纯化的MSCs采用HGF、FGF-4进行诱导培养.留取15、21、27 d细胞培养液进行白蛋白(Alb)、甲胎蛋白(AFP)检测;于27 d收集细胞爬片,进行糖原染色和CK-18免疫细胞化学染色.结果:3组15、21和27 d各MSCs诱导组AFP水平均高于MSCs非诱导组(P<0.01),其中21 d AFP水平最高(肝纤维化模型组:48.94±0.08 vs 9.90±0.09;中药干预组:49.86±0.29vs 8.69±0.62;正常对照组:38.65±0.33 vs9.04±0.11,均P<0.01);3组15 d各MSCs诱导组与MSCs非诱导组白蛋白水平无统计学意义:21 d、27 d各MSCs诱导组白蛋白水平均高于MSCs非诱导组(1.11±0.08 vs 0.32±0.00,1.25±0.04 vs 0.32±0.00,1.06±0.03 vs 0.33±0.00;1.52±0.02 vs 0.33±0.00,1.79±0.01vs 0.31±0.03,1.63±0.04 vs 0.32±0.01,均P<0.01),27 d最高.27 d各MSCs诱导组糖原染色阳性,免疫细胞化学染色CK-18均阳性,而MSCs非诱导组糖原染色、CK-18均阴性.从AFP、Alb水平综合比较,3组诱导效果发现自拟中药干预组优于其他2组.结论:HGF、FGF-4可在体外诱导实验性大鼠的MsCs分化为具有肝细胞样细胞表型和功能的类肝细胞:自体MSCs可以作为治疗临床重症肝病的一种细胞来源,而临床联合中药复方治疗可能会使MSCs体外诱导的效果更为理想.
目的:觀察不同條件下骨髓間充質榦細胞(MSCs)體外誘導分化為類肝細胞的差異.方法:Wistar大鼠24隻隨機均分為3組,分彆為正常對照組、肝纖維化模型組、自擬中藥榦預組.採用CCl4乳劑皮下註射建立肝纖維化模型.造模成功後中藥榦預組採用丹金舒肝膠囊藥液灌胃治療.治療結束後剖殺大鼠,留取大鼠肝髒標本,HE染色觀察各組病理改變.採用密度梯度離心法和貼壁法分離各組大鼠的MSCs,經培養傳代穫得純化的MSCs.各組純化的MSCs採用HGF、FGF-4進行誘導培養.留取15、21、27 d細胞培養液進行白蛋白(Alb)、甲胎蛋白(AFP)檢測;于27 d收集細胞爬片,進行糖原染色和CK-18免疫細胞化學染色.結果:3組15、21和27 d各MSCs誘導組AFP水平均高于MSCs非誘導組(P<0.01),其中21 d AFP水平最高(肝纖維化模型組:48.94±0.08 vs 9.90±0.09;中藥榦預組:49.86±0.29vs 8.69±0.62;正常對照組:38.65±0.33 vs9.04±0.11,均P<0.01);3組15 d各MSCs誘導組與MSCs非誘導組白蛋白水平無統計學意義:21 d、27 d各MSCs誘導組白蛋白水平均高于MSCs非誘導組(1.11±0.08 vs 0.32±0.00,1.25±0.04 vs 0.32±0.00,1.06±0.03 vs 0.33±0.00;1.52±0.02 vs 0.33±0.00,1.79±0.01vs 0.31±0.03,1.63±0.04 vs 0.32±0.01,均P<0.01),27 d最高.27 d各MSCs誘導組糖原染色暘性,免疫細胞化學染色CK-18均暘性,而MSCs非誘導組糖原染色、CK-18均陰性.從AFP、Alb水平綜閤比較,3組誘導效果髮現自擬中藥榦預組優于其他2組.結論:HGF、FGF-4可在體外誘導實驗性大鼠的MsCs分化為具有肝細胞樣細胞錶型和功能的類肝細胞:自體MSCs可以作為治療臨床重癥肝病的一種細胞來源,而臨床聯閤中藥複方治療可能會使MSCs體外誘導的效果更為理想.
목적:관찰불동조건하골수간충질간세포(MSCs)체외유도분화위류간세포적차이.방법:Wistar대서24지수궤균분위3조,분별위정상대조조、간섬유화모형조、자의중약간예조.채용CCl4유제피하주사건립간섬유화모형.조모성공후중약간예조채용단금서간효낭약액관위치료.치료결속후부살대서,류취대서간장표본,HE염색관찰각조병리개변.채용밀도제도리심법화첩벽법분리각조대서적MSCs,경배양전대획득순화적MSCs.각조순화적MSCs채용HGF、FGF-4진행유도배양.류취15、21、27 d세포배양액진행백단백(Alb)、갑태단백(AFP)검측;우27 d수집세포파편,진행당원염색화CK-18면역세포화학염색.결과:3조15、21화27 d각MSCs유도조AFP수평균고우MSCs비유도조(P<0.01),기중21 d AFP수평최고(간섬유화모형조:48.94±0.08 vs 9.90±0.09;중약간예조:49.86±0.29vs 8.69±0.62;정상대조조:38.65±0.33 vs9.04±0.11,균P<0.01);3조15 d각MSCs유도조여MSCs비유도조백단백수평무통계학의의:21 d、27 d각MSCs유도조백단백수평균고우MSCs비유도조(1.11±0.08 vs 0.32±0.00,1.25±0.04 vs 0.32±0.00,1.06±0.03 vs 0.33±0.00;1.52±0.02 vs 0.33±0.00,1.79±0.01vs 0.31±0.03,1.63±0.04 vs 0.32±0.01,균P<0.01),27 d최고.27 d각MSCs유도조당원염색양성,면역세포화학염색CK-18균양성,이MSCs비유도조당원염색、CK-18균음성.종AFP、Alb수평종합비교,3조유도효과발현자의중약간예조우우기타2조.결론:HGF、FGF-4가재체외유도실험성대서적MsCs분화위구유간세포양세포표형화공능적류간세포:자체MSCs가이작위치료림상중증간병적일충세포래원,이림상연합중약복방치료가능회사MSCs체외유도적효과경위이상.
