CAJ | 학술논문

目的:构建肝癌细胞特异性小鼠IL-1a反义RNA表达载体,观察其对H22肝癌细胞小鼠移植瘤生长的影响及其相关机制.方法:构建由AFP最小启动子和CMV增强子嵌合序列调控的携IL-1a反义RNA表达载体pafpIRES2-antiIL-1a1和pafpIRES2-antiIL-1a2,经质粒PCR、限制性酶谱分析、序列测定进行鉴定.反义RNA表达载体转染小鼠H22肝癌细胞,分H22/mock组、H22/antiIL-1a1组、H22/antiIL-1a2三组,RT-PCR检测IL-1a的表达水平.以转染后的H22细胞皮下接种建立荷肝癌小鼠模型,观察移植瘤体积和重量,MTT法检测荷瘤小鼠脾脏中分离的NK细胞对H22细胞的杀伤活性.结果:经质粒PCR、限制性酶谱分析、序列测定证实成功构建能够在肝癌细胞中特异性表达IL-1a反义RNA的表达载体pafpIRES2-antiIL-1a1和pafpIRES2-antiIL-1a2,转染H22细胞后细胞中IL-1a表达水平明显下降,以pafpIRES2-antiIL-1a2更为显著.成功建立荷肝癌小鼠模型,与H22/mock组小鼠相比, H22/antiIL-1a2组小鼠移植瘤体积较小,生长显著减慢(P<0.05). H22/antiIL-1a1、H22/antiIL-1a2组荷瘤小鼠的NK细胞对H22细胞的杀伤活性明显增强(P<0.05或P<0.01).结论:成功构建的肝癌细胞特异性IL-1a反义RNA表达载体可有效抑制小鼠移植肝癌的生长,其机制与靶向阻断IL-1a表达、上调NK细胞的杀伤活性有关.
목적:구건간암세포특이성소서IL-1a반의RNA표체재체,관찰기대H22간암세포소서이식류생장적영향급기상관궤제.방법:구건유AFP최소계동자화CMV증강자감합서렬조공적휴IL-1a반의RNA표체재체pafpIRES2-antiIL-1a1화pafpIRES2-antiIL-1a2,경질립PCR、한제성매보분석、서렬측정진행감정.반의RNA표체재체전염소서H22간암세포,분H22/mock조、H22/antiIL-1a1조、H22/antiIL-1a2삼조,RT-PCR검측IL-1a적표체수평.이전염후적H22세포피하접충건립하간암소서모형,관찰이식류체적화중량,MTT법검측하류소서비장중분리적NK세포대H22세포적살상활성.결과:경질립PCR、한제성매보분석、서렬측정증실성공구건능구재간암세포중특이성표체IL-1a반의RNA적표체재체pafpIRES2-antiIL-1a1화pafpIRES2-antiIL-1a2,전염H22세포후세포중IL-1a표체수평명현하강,이pafpIRES2-antiIL-1a2경위현저.성공건립하간암소서모형,여H22/mock조소서상비, H22/antiIL-1a2조소서이식류체적교소,생장현저감만(P<0.05). H22/antiIL-1a1、H22/antiIL-1a2조하류소서적NK세포대H22세포적살상활성명현증강(P<0.05혹P<0.01).결론:성공구건적간암세포특이성IL-1a반의RNA표체재체가유효억제소서이식간암적생장,기궤제여파향조단IL-1a표체、상조NK세포적살상활성유관.