中国现代神经疾病杂志
中國現代神經疾病雜誌
중국현대신경질병잡지
CHINESE JOURNAL OF CONTEMPORARY NEUROLOGY AND NEUROSURGERY
2010年
4期
479-482
,共4页
高慧玲%王虔%于士柱%陈秀菊%孙翠云%安同岭
高慧玲%王虔%于士柱%陳秀菊%孫翠雲%安同嶺
고혜령%왕건%우사주%진수국%손취운%안동령
软骨素硫酸酶类%质粒%转染%神经胶质瘤%免疫印迹法
軟骨素硫痠酶類%質粒%轉染%神經膠質瘤%免疫印跡法
연골소류산매류%질립%전염%신경효질류%면역인적법
目的 建立硫酸软骨素酶ABC Ⅰ(ChABC Ⅰ)的分泌型真核表达载体,并在胶质瘤细胞系中对其表达情况进行观察.方法 以真核表达载体pCDNA3.1/V5/HIS A为载体,将基底膜40蛋白信号肽编码区和ChABC Ⅰ成熟肽段编码区串联插入其多克隆位点,构建分泌型真核表达质粒pCDNA-BMS-CABC Ⅰ.采用该质粒转染人胶质瘤细胞系TJ905,培养3 d后将培养液上清液行SDS-PAGE和免疫印迹分析.结果 考马斯亮蓝染色显示有新条带出现,条带的相对分子质量大小与理论值一致,免疫印迹检测显示有V5免疫反应性特异性条带出现.结论 该真核表达载体可介导硫酸软骨素酶ABC Ⅰ在神经胶质细胞来源的细胞中以分泌蛋白形式表达.
目的 建立硫痠軟骨素酶ABC Ⅰ(ChABC Ⅰ)的分泌型真覈錶達載體,併在膠質瘤細胞繫中對其錶達情況進行觀察.方法 以真覈錶達載體pCDNA3.1/V5/HIS A為載體,將基底膜40蛋白信號肽編碼區和ChABC Ⅰ成熟肽段編碼區串聯插入其多剋隆位點,構建分泌型真覈錶達質粒pCDNA-BMS-CABC Ⅰ.採用該質粒轉染人膠質瘤細胞繫TJ905,培養3 d後將培養液上清液行SDS-PAGE和免疫印跡分析.結果 攷馬斯亮藍染色顯示有新條帶齣現,條帶的相對分子質量大小與理論值一緻,免疫印跡檢測顯示有V5免疫反應性特異性條帶齣現.結論 該真覈錶達載體可介導硫痠軟骨素酶ABC Ⅰ在神經膠質細胞來源的細胞中以分泌蛋白形式錶達.
목적 건립류산연골소매ABC Ⅰ(ChABC Ⅰ)적분비형진핵표체재체,병재효질류세포계중대기표체정황진행관찰.방법 이진핵표체재체pCDNA3.1/V5/HIS A위재체,장기저막40단백신호태편마구화ChABC Ⅰ성숙태단편마구천련삽입기다극륭위점,구건분비형진핵표체질립pCDNA-BMS-CABC Ⅰ.채용해질립전염인효질류세포계TJ905,배양3 d후장배양액상청액행SDS-PAGE화면역인적분석.결과 고마사량람염색현시유신조대출현,조대적상대분자질량대소여이론치일치,면역인적검측현시유V5면역반응성특이성조대출현.결론 해진핵표체재체가개도류산연골소매ABC Ⅰ재신경효질세포래원적세포중이분비단백형식표체.
