生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2010年
12期
191-195
,共5页
黄仕杰%程抒劼%郭心悦%郭丽琼%林俊芳
黃仕傑%程抒劼%郭心悅%郭麗瓊%林俊芳
황사걸%정서할%곽심열%곽려경%림준방
蔓地亚红豆杉%紫杉醇%3'-N-去苯甲酰-2-脱氧紫杉醇苯甲酰转移酶%基因克隆%序列分析
蔓地亞紅豆杉%紫杉醇%3'-N-去苯甲酰-2-脫氧紫杉醇苯甲酰轉移酶%基因剋隆%序列分析
만지아홍두삼%자삼순%3'-N-거분갑선-2-탈양자삼순분갑선전이매%기인극륭%서렬분석
3'-N-去苯甲酰-2-脱氧紫杉醇苯甲酰转移酶(DBTNBT)是催化紫杉醇生物合成最后一步反应所需要的酶,负责将带有不完全侧链的紫杉醇前体催化形成紫杉醇.利用蔓地亚红豆杉的总DNA和总RNA为模板,采用PCR和RT-PCR技术克隆出DBTNBT基因的DNA序列和cDNA序列,测序结果显示长度分别为1 465 bp和1 362 bp,编码438个氨基酸的多肽.同源性比较分析结果表明,其碱基序列与已经报道的蔓地亚红豆杉的DBTNBT基因的一致性为99%,其氨基酸序列与已经报道的蔓地亚红豆杉的DBTNBT氨基酸序列的一致性为96%.DNA序列和cDNA序列比对发现该基因含有1个内含子.利用SWISS-PROT、DNAMAN等生物信息学工具对其蛋白序列进行了分析,为利用基因工程的方法生产紫杉醇或其前体物质提供了分子基础.
3'-N-去苯甲酰-2-脫氧紫杉醇苯甲酰轉移酶(DBTNBT)是催化紫杉醇生物閤成最後一步反應所需要的酶,負責將帶有不完全側鏈的紫杉醇前體催化形成紫杉醇.利用蔓地亞紅豆杉的總DNA和總RNA為模闆,採用PCR和RT-PCR技術剋隆齣DBTNBT基因的DNA序列和cDNA序列,測序結果顯示長度分彆為1 465 bp和1 362 bp,編碼438箇氨基痠的多肽.同源性比較分析結果錶明,其堿基序列與已經報道的蔓地亞紅豆杉的DBTNBT基因的一緻性為99%,其氨基痠序列與已經報道的蔓地亞紅豆杉的DBTNBT氨基痠序列的一緻性為96%.DNA序列和cDNA序列比對髮現該基因含有1箇內含子.利用SWISS-PROT、DNAMAN等生物信息學工具對其蛋白序列進行瞭分析,為利用基因工程的方法生產紫杉醇或其前體物質提供瞭分子基礎.
3'-N-거분갑선-2-탈양자삼순분갑선전이매(DBTNBT)시최화자삼순생물합성최후일보반응소수요적매,부책장대유불완전측련적자삼순전체최화형성자삼순.이용만지아홍두삼적총DNA화총RNA위모판,채용PCR화RT-PCR기술극륭출DBTNBT기인적DNA서렬화cDNA서렬,측서결과현시장도분별위1 465 bp화1 362 bp,편마438개안기산적다태.동원성비교분석결과표명,기감기서렬여이경보도적만지아홍두삼적DBTNBT기인적일치성위99%,기안기산서렬여이경보도적만지아홍두삼적DBTNBT안기산서렬적일치성위96%.DNA서렬화cDNA서렬비대발현해기인함유1개내함자.이용SWISS-PROT、DNAMAN등생물신식학공구대기단백서렬진행료분석,위이용기인공정적방법생산자삼순혹기전체물질제공료분자기출.
