昆明医学院学报
昆明醫學院學報
곤명의학원학보
ACADEMIC JOURNAL OF KUNMING MEDICAL COLLEGE
2011年
1期
41-47
,共7页
毛希宏%杨智勇%孟明耀%侯宗柳%庞伟%魏传钰
毛希宏%楊智勇%孟明耀%侯宗柳%龐偉%魏傳鈺
모희굉%양지용%맹명요%후종류%방위%위전옥
脐带间充质干细胞%神经细胞%分化
臍帶間充質榦細胞%神經細胞%分化
제대간충질간세포%신경세포%분화
目的 研究脐带间充质干细胞(UC-MSCs)在体外分离、培养、扩增和鉴定以及向神经元分化的方法.方法 30例符合入选标准的脐带采用贴壁法分离得到UC-MSCs,选用20% FBS血清培养液进行原代培养,再选用10% FBS扩增培养液进行一般传代.用神经分化培养基诱导UC-MSCs向神经细胞分化,在荧光显微镜下观察细胞形态, 透射电镜观察UC-MSCs超微结构,用流式细胞仪分析其表面特性,采用直接和间接免疫荧光法检测细胞悬浮液的表型特征,用抗人神经纤维 M、突触素、微管蛋白、半乳糖神经酰胺的单克隆抗体检测各代之间神经诱导形成率.结果 12 h后细胞开始贴壁生长,超微结构观察表现出未分化细胞的特征,CD123、CD49、CD29、CD73和CD166均为阳性,免疫荧光检测人UC-MSCs分化成神经细胞.结论 UC-MSCs长期传代培养,生物学特性稳定,具有向神经细胞分化的潜能.
目的 研究臍帶間充質榦細胞(UC-MSCs)在體外分離、培養、擴增和鑒定以及嚮神經元分化的方法.方法 30例符閤入選標準的臍帶採用貼壁法分離得到UC-MSCs,選用20% FBS血清培養液進行原代培養,再選用10% FBS擴增培養液進行一般傳代.用神經分化培養基誘導UC-MSCs嚮神經細胞分化,在熒光顯微鏡下觀察細胞形態, 透射電鏡觀察UC-MSCs超微結構,用流式細胞儀分析其錶麵特性,採用直接和間接免疫熒光法檢測細胞懸浮液的錶型特徵,用抗人神經纖維 M、突觸素、微管蛋白、半乳糖神經酰胺的單剋隆抗體檢測各代之間神經誘導形成率.結果 12 h後細胞開始貼壁生長,超微結構觀察錶現齣未分化細胞的特徵,CD123、CD49、CD29、CD73和CD166均為暘性,免疫熒光檢測人UC-MSCs分化成神經細胞.結論 UC-MSCs長期傳代培養,生物學特性穩定,具有嚮神經細胞分化的潛能.
목적 연구제대간충질간세포(UC-MSCs)재체외분리、배양、확증화감정이급향신경원분화적방법.방법 30례부합입선표준적제대채용첩벽법분리득도UC-MSCs,선용20% FBS혈청배양액진행원대배양,재선용10% FBS확증배양액진행일반전대.용신경분화배양기유도UC-MSCs향신경세포분화,재형광현미경하관찰세포형태, 투사전경관찰UC-MSCs초미결구,용류식세포의분석기표면특성,채용직접화간접면역형광법검측세포현부액적표형특정,용항인신경섬유 M、돌촉소、미관단백、반유당신경선알적단극륭항체검측각대지간신경유도형성솔.결과 12 h후세포개시첩벽생장,초미결구관찰표현출미분화세포적특정,CD123、CD49、CD29、CD73화CD166균위양성,면역형광검측인UC-MSCs분화성신경세포.결론 UC-MSCs장기전대배양,생물학특성은정,구유향신경세포분화적잠능.
