CAJ | 학술논문

本研究旨在通过对广西省重型β地中海贫血患者和正常人外周血中γ珠蛋白基因启动子区CpG岛的甲基化位点的确认和对各个CPC位点甲基化率在重型β地中海贫血患者与正常人之间的差异性分析,初步筛选出可能影响γ珠蛋白表达的主要甲基化位点.采用重亚硫酸盐测序法修饰,递降PCR扩增,最后对PCR产物进行DNA克隆测序,得到目的片段中每个CG位点的甲基化情况,定量检测甲基化的确切位置与程度.结果表明:重型β地中海贫血患者与正常人γ珠蛋白基因启动子区存在4个CpC甲基化位点,在序列中分别位于28、122、231和234bp,均呈高度甲基化,其中122和231 bp位点甲基化率明显低于正常对照组,差异均有统计学意义.28和234 bp位点甲基化率与正常对照组均无显著性差异.结论:证实γ基因启动子区存在甲基化位点、明确位点位置且经定量分析证实无论地中海贫血患者还是正常人各个甲基化位点均呈高甲基化状态；初步筛选出影响γ珠蛋白表达的主要位点可能在122和231 bp,为后续通过调节γ珠蛋白的表达缓解重型β地中海贫血的临床症状、靶向基因治疗研究提供了实验依据.
본연구지재통과대광서성중형β지중해빈혈환자화정상인외주혈중γ주단백기인계동자구CpG도적갑기화위점적학인화대각개CPC위점갑기화솔재중형β지중해빈혈환자여정상인지간적차이성분석,초보사선출가능영향γ주단백표체적주요갑기화위점.채용중아류산염측서법수식,체강PCR확증,최후대PCR산물진행DNA극륭측서,득도목적편단중매개CG위점적갑기화정황,정량검측갑기화적학절위치여정도.결과표명:중형β지중해빈혈환자여정상인γ주단백기인계동자구존재4개CpC갑기화위점,재서렬중분별위우28、122、231화234bp,균정고도갑기화,기중122화231 bp위점갑기화솔명현저우정상대조조,차이균유통계학의의.28화234 bp위점갑기화솔여정상대조조균무현저성차이.결론:증실γ기인계동자구존재갑기화위점、명학위점위치차경정량분석증실무론지중해빈혈환자환시정상인각개갑기화위점균정고갑기화상태；초보사선출영향γ주단백표체적주요위점가능재122화231 bp,위후속통과조절γ주단백적표체완해중형β지중해빈혈적림상증상、파향기인치료연구제공료실험의거.