生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2004年
1期
25-29
,共5页
叶祥忠%郭强%李朝%刘凤云%程度胜
葉祥忠%郭彊%李朝%劉鳳雲%程度勝
협상충%곽강%리조%류봉운%정도성
TPO模拟肽%毕赤酵母%融合蛋白
TPO模擬肽%畢赤酵母%融閤蛋白
TPO모의태%필적효모%융합단백
构建TPO模拟肽与人IgG1Fc融合蛋白的酵母表达体系.利用PCR技术,从重组质粒pET28a-TMPFc中,扩增TPO模拟肽与人IgG1Fc 的DNA片段,连入pPICZαA酵母表达载体,电激法转化毕赤酵母.用MDH和MMH筛选具有正确表型的重组转化子,PCR、蛋白质印迹鉴定融合基因.MTT法鉴定TMPFc对Ba/F3-mpl细胞生长的促进作用.构建的重组毕赤酵母实现了TMPFc的分泌表达,表达量占外分泌蛋白质的65%.表达蛋白质的相对分子量约64kD,对Ba/F3-mpl生长具有促进作用.TMPFc酵母表达体系表达出可观的二价模拟肽,为二价TMP活性的定量研究奠定基础.
構建TPO模擬肽與人IgG1Fc融閤蛋白的酵母錶達體繫.利用PCR技術,從重組質粒pET28a-TMPFc中,擴增TPO模擬肽與人IgG1Fc 的DNA片段,連入pPICZαA酵母錶達載體,電激法轉化畢赤酵母.用MDH和MMH篩選具有正確錶型的重組轉化子,PCR、蛋白質印跡鑒定融閤基因.MTT法鑒定TMPFc對Ba/F3-mpl細胞生長的促進作用.構建的重組畢赤酵母實現瞭TMPFc的分泌錶達,錶達量佔外分泌蛋白質的65%.錶達蛋白質的相對分子量約64kD,對Ba/F3-mpl生長具有促進作用.TMPFc酵母錶達體繫錶達齣可觀的二價模擬肽,為二價TMP活性的定量研究奠定基礎.
구건TPO모의태여인IgG1Fc융합단백적효모표체체계.이용PCR기술,종중조질립pET28a-TMPFc중,확증TPO모의태여인IgG1Fc 적DNA편단,련입pPICZαA효모표체재체,전격법전화필적효모.용MDH화MMH사선구유정학표형적중조전화자,PCR、단백질인적감정융합기인.MTT법감정TMPFc대Ba/F3-mpl세포생장적촉진작용.구건적중조필적효모실현료TMPFc적분비표체,표체량점외분비단백질적65%.표체단백질적상대분자량약64kD,대Ba/F3-mpl생장구유촉진작용.TMPFc효모표체체계표체출가관적이개모의태,위이개TMP활성적정량연구전정기출.
