过程工程学报
過程工程學報
과정공정학보
The Chinese Journal of Process Engineering
2008年
1期
135-139
,共5页
黄星%曾行%刘铭%龚博%胡淼%曹竹安
黃星%曾行%劉銘%龔博%鬍淼%曹竹安
황성%증행%류명%공박%호묘%조죽안
谷氨酰胺%大肠杆菌%谷氨酰胺合成酶%腺苷化位点
穀氨酰胺%大腸桿菌%穀氨酰胺閤成酶%腺苷化位點
곡안선알%대장간균%곡안선알합성매%선감화위점
为解决谷氨酰胺合成酶腺苷酰化修饰失活的问题,利用基因定点突变的方法将谷氨酸棒杆菌的谷氨酰胺合成酶(Glutamine Synthetase,GS)腺苷酰化位点由Tyr405突变为Phe405,并在大肠杆菌中获得突变后GS的表达-对比腺苷酰化位点突变前后的重组大肠杆菌pET-3a/GSI和pET-3a/GSIM在高氨环境下的GS活性和谷氨酰胺产量,发现重组菌pET-3a/GSIM在高氨环境下的最大酶活是150 U/L,产谷氨酰胺浓度为17.5 g/L,分别是pET-3a/GSI酶活(30 U/L)的5-0倍和产谷氨酰胺水平(3-4 g/L)的5-1倍,GS定点突变使谷氨酸转化为谷氨酰胺的途径得到强化-
為解決穀氨酰胺閤成酶腺苷酰化脩飾失活的問題,利用基因定點突變的方法將穀氨痠棒桿菌的穀氨酰胺閤成酶(Glutamine Synthetase,GS)腺苷酰化位點由Tyr405突變為Phe405,併在大腸桿菌中穫得突變後GS的錶達-對比腺苷酰化位點突變前後的重組大腸桿菌pET-3a/GSI和pET-3a/GSIM在高氨環境下的GS活性和穀氨酰胺產量,髮現重組菌pET-3a/GSIM在高氨環境下的最大酶活是150 U/L,產穀氨酰胺濃度為17.5 g/L,分彆是pET-3a/GSI酶活(30 U/L)的5-0倍和產穀氨酰胺水平(3-4 g/L)的5-1倍,GS定點突變使穀氨痠轉化為穀氨酰胺的途徑得到彊化-
위해결곡안선알합성매선감선화수식실활적문제,이용기인정점돌변적방법장곡안산봉간균적곡안선알합성매(Glutamine Synthetase,GS)선감선화위점유Tyr405돌변위Phe405,병재대장간균중획득돌변후GS적표체-대비선감선화위점돌변전후적중조대장간균pET-3a/GSI화pET-3a/GSIM재고안배경하적GS활성화곡안선알산량,발현중조균pET-3a/GSIM재고안배경하적최대매활시150 U/L,산곡안선알농도위17.5 g/L,분별시pET-3a/GSI매활(30 U/L)적5-0배화산곡안선알수평(3-4 g/L)적5-1배,GS정점돌변사곡안산전화위곡안선알적도경득도강화-
