CAJ | 학술논문

背景:祛脂素为复方中药制剂,其化学成分包含维生素A、胡萝卜素、芸香甙及槐甙A、B、C和生物碱等,可抑制脂肪细胞分化成熟.骨髓间充质干细胞可定向分化为脂肪细胞,因此可将其作为阻止骨髓脂肪化、成为治疗再生障碍性贫血的一个可能靶点.目的:观察复方中药祛脂素对再生障碍性贫血骨髓间充质干细胞向脂肪细胞分化的干预效果.设计、时间及地点:细胞观察,于2006-06/2007-03在大连医科大学附属二院血液风湿科实验室完成.材料:骨髓间充质干细胞来自12例再生障碍性贫血患者.祛脂素为本科室辅助治疗再生障碍性贫血的科内中药验方,主要含五灵脂、槐花米和山楂,每毫升相当于原中药材1g的糊状药液.方法:抽取患者骨髓液,Ficoll+贴壁法分离培养骨髓单个核细胞,达70%～80%融合后扩增传代.取传至第3代的骨髓间充质干细胞,分为2组:脂肪细胞诱导组向含有10%FBS的DMEM培养体系中加入终浓度为0.5μmol/L氢化可的松、1 μmol/L地塞米松、10 mg/L生胰岛素;祛脂素组在其基础上加入终浓度为1g/L的祛脂素,培养14 d.主要观察指标:计算脂肪细胞阳性率.采用RT-PCR及Western blotting法测定细胞内PPARγ mRNA、蛋白水平的表达.结果:与脂肪细胞诱导组比较,祛脂素组脂肪细胞阳性率、细胞内PPARγ mRNA水平、PPAR γ蛋白水平均明显下降(t=18.6,P<0.01:t=189.64,P<0.01:t=15.93,P<0.01).结论:祛脂素对再生障碍性贫血的骨髓间充质干细胞脂肪分化具有抑制作用,通过减少脂肪细胞形成、降低脂肪细胞特异性标志PPAR γ的转录及蛋白表达,帮助恢复骨髓造血功能.
배경:거지소위복방중약제제,기화학성분포함유생소A、호라복소、예향대급괴대A、B、C화생물감등,가억제지방세포분화성숙.골수간충질간세포가정향분화위지방세포,인차가장기작위조지골수지방화、성위치료재생장애성빈혈적일개가능파점.목적:관찰복방중약거지소대재생장애성빈혈골수간충질간세포향지방세포분화적간예효과.설계、시간급지점:세포관찰,우2006-06/2007-03재대련의과대학부속이원혈액풍습과실험실완성.재료:골수간충질간세포래자12례재생장애성빈혈환자.거지소위본과실보조치료재생장애성빈혈적과내중약험방,주요함오령지、괴화미화산사,매호승상당우원중약재1g적호상약액.방법:추취환자골수액,Ficoll+첩벽법분리배양골수단개핵세포,체70%～80%융합후확증전대.취전지제3대적골수간충질간세포,분위2조:지방세포유도조향함유10%FBS적DMEM배양체계중가입종농도위0.5μmol/L경화가적송、1 μmol/L지새미송、10 mg/L생이도소;거지소조재기기출상가입종농도위1g/L적거지소,배양14 d.주요관찰지표:계산지방세포양성솔.채용RT-PCR급Western blotting법측정세포내PPARγ mRNA、단백수평적표체.결과:여지방세포유도조비교,거지소조지방세포양성솔、세포내PPARγ mRNA수평、PPAR γ단백수평균명현하강(t=18.6,P<0.01:t=189.64,P<0.01:t=15.93,P<0.01).결론:거지소대재생장애성빈혈적골수간충질간세포지방분화구유억제작용,통과감소지방세포형성、강저지방세포특이성표지PPAR γ적전록급단백표체,방조회복골수조혈공능.