中国老年学杂志
中國老年學雜誌
중국노년학잡지
CHINESE JOURNAL OF GERONTOLOGY
2009年
4期
409-412
,共4页
华声瑜%赵桂峰%郭茂娟%范英昌
華聲瑜%趙桂峰%郭茂娟%範英昌
화성유%조계봉%곽무연%범영창
丹酚酸B%骨髓间充质干细胞%5-氮胞苷%心肌样细胞%基因
丹酚痠B%骨髓間充質榦細胞%5-氮胞苷%心肌樣細胞%基因
단분산B%골수간충질간세포%5-담포감%심기양세포%기인
目的 探讨丹参单体丹酚酸B(Salvianolic acid B,SalB)在体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为心肌样细胞的情况及Nkx2.5、GATA-4、Desmin和α-actin mRNA的表达,确定大鼠 MSCs 体外诱导为心肌样细胞的条件、规律及转化细胞的特点.方法 选用成年近交系Wistar大鼠,利用percoll分离液进行密度梯度离心法和直接贴壁法进行分离、提纯 MSCs,并进行培养扩增.免疫组化方法对第9代MSCs表面抗原进行鉴定.分别应用10 μmol/L 5-氮胞苷(5-aza)及250 mg/L SalB联合5-aza(5-aza+SalB)对第9代的MSCs进行联合诱导24 h,于诱导后第4周,用实时荧光定量RT-PCR法检测Nkx2.5、GATA-4、Desmin和α-actin的基因表达.结果 ①第9代MSCs免疫组化染色CD44呈阳性表达,CD34呈阴性表达.②诱导4 w后,细胞体积变小,可见由几个细胞连接形成的多核肌管样结构.5-aza组、5-aza+SalB组均出现明确的心肌早期分化基因;与5-aza组相比,5-aza+SalB组的Nkx2.5、GATA-4、Desmin 和α-actin mRNA的表达明显增强.结论 SalB具有促进5-aza诱导的MSCs向心肌样细胞分化的作用,并且在Nkx2.5基因表达上SalB的优势更加明显.
目的 探討丹參單體丹酚痠B(Salvianolic acid B,SalB)在體外誘導大鼠骨髓間充質榦細胞(MSCs)分化為心肌樣細胞的情況及Nkx2.5、GATA-4、Desmin和α-actin mRNA的錶達,確定大鼠 MSCs 體外誘導為心肌樣細胞的條件、規律及轉化細胞的特點.方法 選用成年近交繫Wistar大鼠,利用percoll分離液進行密度梯度離心法和直接貼壁法進行分離、提純 MSCs,併進行培養擴增.免疫組化方法對第9代MSCs錶麵抗原進行鑒定.分彆應用10 μmol/L 5-氮胞苷(5-aza)及250 mg/L SalB聯閤5-aza(5-aza+SalB)對第9代的MSCs進行聯閤誘導24 h,于誘導後第4週,用實時熒光定量RT-PCR法檢測Nkx2.5、GATA-4、Desmin和α-actin的基因錶達.結果 ①第9代MSCs免疫組化染色CD44呈暘性錶達,CD34呈陰性錶達.②誘導4 w後,細胞體積變小,可見由幾箇細胞連接形成的多覈肌管樣結構.5-aza組、5-aza+SalB組均齣現明確的心肌早期分化基因;與5-aza組相比,5-aza+SalB組的Nkx2.5、GATA-4、Desmin 和α-actin mRNA的錶達明顯增彊.結論 SalB具有促進5-aza誘導的MSCs嚮心肌樣細胞分化的作用,併且在Nkx2.5基因錶達上SalB的優勢更加明顯.
목적 탐토단삼단체단분산B(Salvianolic acid B,SalB)재체외유도대서골수간충질간세포(MSCs)분화위심기양세포적정황급Nkx2.5、GATA-4、Desmin화α-actin mRNA적표체,학정대서 MSCs 체외유도위심기양세포적조건、규률급전화세포적특점.방법 선용성년근교계Wistar대서,이용percoll분리액진행밀도제도리심법화직접첩벽법진행분리、제순 MSCs,병진행배양확증.면역조화방법대제9대MSCs표면항원진행감정.분별응용10 μmol/L 5-담포감(5-aza)급250 mg/L SalB연합5-aza(5-aza+SalB)대제9대적MSCs진행연합유도24 h,우유도후제4주,용실시형광정량RT-PCR법검측Nkx2.5、GATA-4、Desmin화α-actin적기인표체.결과 ①제9대MSCs면역조화염색CD44정양성표체,CD34정음성표체.②유도4 w후,세포체적변소,가견유궤개세포련접형성적다핵기관양결구.5-aza조、5-aza+SalB조균출현명학적심기조기분화기인;여5-aza조상비,5-aza+SalB조적Nkx2.5、GATA-4、Desmin 화α-actin mRNA적표체명현증강.결론 SalB구유촉진5-aza유도적MSCs향심기양세포분화적작용,병차재Nkx2.5기인표체상SalB적우세경가명현.
