临床肝胆病杂志
臨床肝膽病雜誌
림상간담병잡지
CHINESE JOURNAL OF CLINICAL HEPATOLOGY
2009年
4期
264-266
,共3页
PBMC%IL-18%RT-PCR%基因克隆%重组表达
PBMC%IL-18%RT-PCR%基因剋隆%重組錶達
PBMC%IL-18%RT-PCR%기인극륭%중조표체
目的 克隆人IL-18编码区cDNA,研究其在大肠杆菌中的表达.方法 应用RT-PCR方法 从人外周血单个核细胞(PBMC)中扩增出成熟(hIL-18)cDNA.利用基因重组技术构建IL-18的原核重组表达质粒pGEX-3X-hIL-18,转化E.coli JM109,以IPTG诱导培养,收集菌体直接进行SDS-PAGE分析.结果 经测序证实获得人IL-18的cDNA序列与文献报道的cDNA完全一致;携此重组质粒pGEX-3X-hIL-18的大肠杆菌经IPTG诱导,表达了分子量为43kD的重组融合蛋白.结论 克隆了人IL-18cDNA,利用大肠杆菌成功地表达了重组蛋白.为进一步探讨人IL-18的生物学作用及可能的临床应用打下基础.
目的 剋隆人IL-18編碼區cDNA,研究其在大腸桿菌中的錶達.方法 應用RT-PCR方法 從人外週血單箇覈細胞(PBMC)中擴增齣成熟(hIL-18)cDNA.利用基因重組技術構建IL-18的原覈重組錶達質粒pGEX-3X-hIL-18,轉化E.coli JM109,以IPTG誘導培養,收集菌體直接進行SDS-PAGE分析.結果 經測序證實穫得人IL-18的cDNA序列與文獻報道的cDNA完全一緻;攜此重組質粒pGEX-3X-hIL-18的大腸桿菌經IPTG誘導,錶達瞭分子量為43kD的重組融閤蛋白.結論 剋隆瞭人IL-18cDNA,利用大腸桿菌成功地錶達瞭重組蛋白.為進一步探討人IL-18的生物學作用及可能的臨床應用打下基礎.
목적 극륭인IL-18편마구cDNA,연구기재대장간균중적표체.방법 응용RT-PCR방법 종인외주혈단개핵세포(PBMC)중확증출성숙(hIL-18)cDNA.이용기인중조기술구건IL-18적원핵중조표체질립pGEX-3X-hIL-18,전화E.coli JM109,이IPTG유도배양,수집균체직접진행SDS-PAGE분석.결과 경측서증실획득인IL-18적cDNA서렬여문헌보도적cDNA완전일치;휴차중조질립pGEX-3X-hIL-18적대장간균경IPTG유도,표체료분자량위43kD적중조융합단백.결론 극륭료인IL-18cDNA,이용대장간균성공지표체료중조단백.위진일보탐토인IL-18적생물학작용급가능적림상응용타하기출.
