CAJ | 학술논문

用EDC法将BSA和OVA分别和环丙沙星(Ciprofloxacin,CIP)偶联作为免疫原和包被原,并经紫外扫描(UV Scan)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定.用合成的BSA-CIP免疫BALB/c小鼠,经过3次免疫后,用间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠,选择高效价、敏感的小鼠进行抗原超强免疫;取其脾细胞应用杂交瘤技术与骨髓瘤细胞建立分泌CIP单克隆抗体的杂交瘤细胞株;用体内诱生腹水法制备CIP mAb,对CIPmAb的效价、敏感性和特异性等免疫学特性进行鉴定.聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定表明BSA-CIP人工抗原偶联成功;免疫的3只小鼠血清抗体效价均达到10-4;其中2号小鼠血清CIP抑制效价较高且IC50最低,达48.59μg/L,融合后筛选出Z3G12B3和Z2H8C10两株敏感特异的杂交瘤细胞,其两株细胞培养上清液效价为1:512,腹水效价为1:2.56×105,Z3G12B3株对CIP的IC50为2.47μg/L,与二氟沙星、沙拉沙星有小于0.03%的交叉反应性.与其他抑制物无交叉反应性.该试验获得了高效价、敏感、特异的抗CIP mAb,为CIP残留ELISA检测试剂盒和试纸条的建立奠定了坚实的基础.
용EDC법장BSA화OVA분별화배병사성(Ciprofloxacin,CIP)우련작위면역원화포피원,병경자외소묘(UV Scan)、취병희선알응효전영(SDS-PAGE)감정.용합성적BSA-CIP면역BALB/c소서,경과3차면역후,용간접ELISA화조단ELISA선택세포융합비용서,선택고효개、민감적소서진행항원초강면역;취기비세포응용잡교류기술여골수류세포건립분비CIP단극륭항체적잡교류세포주;용체내유생복수법제비CIP mAb,대CIPmAb적효개、민감성화특이성등면역학특성진행감정.취병희선알응효전영감정표명BSA-CIP인공항원우련성공;면역적3지소서혈청항체효개균체도10-4;기중2호소서혈청CIP억제효개교고차IC50최저,체48.59μg/L,융합후사선출Z3G12B3화Z2H8C10량주민감특이적잡교류세포,기량주세포배양상청액효개위1:512,복수효개위1:2.56×105,Z3G12B3주대CIP적IC50위2.47μg/L,여이불사성、사랍사성유소우0.03%적교차반응성.여기타억제물무교차반응성.해시험획득료고효개、민감、특이적항CIP mAb,위CIP잔류ELISA검측시제합화시지조적건립전정료견실적기출.