北京交通大学学报
北京交通大學學報
북경교통대학학보
JOURNAL OF NORTHERN JIAOTONG UNIVERSITY
2010年
6期
118-121,127
,共5页
生物化学%重组蛋白%蛋白纯化%柱上复性
生物化學%重組蛋白%蛋白純化%柱上複性
생물화학%중조단백%단백순화%주상복성
为了获得有较高生物活性的靶向重组毒素DT389-IL13,在大肠杆菌中高效表达DT389-IL13,并采用凝胶过滤的方法对DT389-IL13进行柱上复性及初步纯化,然后使用离子交换色谱方法进一步纯化,最后应用CCK-8细胞活力检测试剂盒检测DT389-IL13对肿瘤细胞的抑制作用.实验结果显示,经柱上复性和纯化后,DT389-IL13的纯度可达90%以上,且对脑胶质瘤细胞U251有明显的抑制作用,存在明确的剂量依赖关系,48 h的半数抑制浓度为8.87×10-10mol/L.表明联合应用凝胶过滤和离子交换两种色谱方法可获得高纯度的复性蛋白,是可行的复性及纯化方案.
為瞭穫得有較高生物活性的靶嚮重組毒素DT389-IL13,在大腸桿菌中高效錶達DT389-IL13,併採用凝膠過濾的方法對DT389-IL13進行柱上複性及初步純化,然後使用離子交換色譜方法進一步純化,最後應用CCK-8細胞活力檢測試劑盒檢測DT389-IL13對腫瘤細胞的抑製作用.實驗結果顯示,經柱上複性和純化後,DT389-IL13的純度可達90%以上,且對腦膠質瘤細胞U251有明顯的抑製作用,存在明確的劑量依賴關繫,48 h的半數抑製濃度為8.87×10-10mol/L.錶明聯閤應用凝膠過濾和離子交換兩種色譜方法可穫得高純度的複性蛋白,是可行的複性及純化方案.
위료획득유교고생물활성적파향중조독소DT389-IL13,재대장간균중고효표체DT389-IL13,병채용응효과려적방법대DT389-IL13진행주상복성급초보순화,연후사용리자교환색보방법진일보순화,최후응용CCK-8세포활력검측시제합검측DT389-IL13대종류세포적억제작용.실험결과현시,경주상복성화순화후,DT389-IL13적순도가체90%이상,차대뇌효질류세포U251유명현적억제작용,존재명학적제량의뢰관계,48 h적반수억제농도위8.87×10-10mol/L.표명연합응용응효과려화리자교환량충색보방법가획득고순도적복성단백,시가행적복성급순화방안.
