安徽医科大学学报
安徽醫科大學學報
안휘의과대학학보
ACTA UNIVERSITY MEDICINALIS ANHUI
2011年
4期
321-324
,共4页
汪礼文%唐小牛%姚湧%汪学龙
汪禮文%唐小牛%姚湧%汪學龍
왕례문%당소우%요용%왕학룡
血吸虫,日本%基因表达
血吸蟲,日本%基因錶達
혈흡충,일본%기인표체
目的 从日本血吸虫成虫cDNA中扩增出钙结合蛋白样蛋白SjP14编码基因,并亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+),制备重组分子疫苗.方法 提取日本血吸虫成虫总RNA,逆转录cDNA,设计引物常规PCR法扩增出SjP14编码基因,通过线性T克隆载体pGEM-T连接,亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+),经转染至Hela细胞中表达,表达产物经Western blot鉴定.结果 PCR扩增产物与预期大小相一致,pGEM-T-SjP14及pcDNA3.1(+)-SjP14分别经双酶切后均获得一特异性基因片段,表达产物经Western blot鉴定分子量约为38ku.结论 成功构建了日本血吸虫钙结合蛋白样蛋白真核表达载体,并获得了表达产物.
目的 從日本血吸蟲成蟲cDNA中擴增齣鈣結閤蛋白樣蛋白SjP14編碼基因,併亞剋隆至真覈錶達載體pcDNA3.1(+),製備重組分子疫苗.方法 提取日本血吸蟲成蟲總RNA,逆轉錄cDNA,設計引物常規PCR法擴增齣SjP14編碼基因,通過線性T剋隆載體pGEM-T連接,亞剋隆至真覈錶達載體pcDNA3.1(+),經轉染至Hela細胞中錶達,錶達產物經Western blot鑒定.結果 PCR擴增產物與預期大小相一緻,pGEM-T-SjP14及pcDNA3.1(+)-SjP14分彆經雙酶切後均穫得一特異性基因片段,錶達產物經Western blot鑒定分子量約為38ku.結論 成功構建瞭日本血吸蟲鈣結閤蛋白樣蛋白真覈錶達載體,併穫得瞭錶達產物.
목적 종일본혈흡충성충cDNA중확증출개결합단백양단백SjP14편마기인,병아극륭지진핵표체재체pcDNA3.1(+),제비중조분자역묘.방법 제취일본혈흡충성충총RNA,역전록cDNA,설계인물상규PCR법확증출SjP14편마기인,통과선성T극륭재체pGEM-T련접,아극륭지진핵표체재체pcDNA3.1(+),경전염지Hela세포중표체,표체산물경Western blot감정.결과 PCR확증산물여예기대소상일치,pGEM-T-SjP14급pcDNA3.1(+)-SjP14분별경쌍매절후균획득일특이성기인편단,표체산물경Western blot감정분자량약위38ku.결론 성공구건료일본혈흡충개결합단백양단백진핵표체재체,병획득료표체산물.
