中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2011年
5期
395-398
,共4页
刘霄卉%罗军荣%斯日古楞%周建华%马学恩
劉霄卉%囉軍榮%斯日古楞%週建華%馬學恩
류소훼%라군영%사일고릉%주건화%마학은
绵羊肺腺瘤病毒%表面蛋白%真核表达%细胞内定位
綿羊肺腺瘤病毒%錶麵蛋白%真覈錶達%細胞內定位
면양폐선류병독%표면단백%진핵표체%세포내정위
为研究绵羊肺腺瘤病病毒(JSRV)表面蛋白(SU)的致瘤机制,本研究构建稳定表达SU的羊肺细胞A549细胞系.采用PCR方法从含su基因的pGEX-4T-1-SU重组质粒中扩增SU编码序列,将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)中,转染A549细胞.通过G418筛选,对转染阳性细胞进行纯化,获得稳定表达JSRV SU蛋白的A549细胞系.以间接免疫荧光及western blot鉴定SU的表达状况,并运用共聚焦显微镜确认SU蛋白的亚细胞定位.结果表明,重组蛋白SU在A549细胞中有效表达,而且主要分布于细胞质中.该细胞系的建立为SU生物学功能的体外研究提供了平台.
為研究綿羊肺腺瘤病病毒(JSRV)錶麵蛋白(SU)的緻瘤機製,本研究構建穩定錶達SU的羊肺細胞A549細胞繫.採用PCR方法從含su基因的pGEX-4T-1-SU重組質粒中擴增SU編碼序列,將其剋隆至真覈錶達載體pcDNA3.1(+)中,轉染A549細胞.通過G418篩選,對轉染暘性細胞進行純化,穫得穩定錶達JSRV SU蛋白的A549細胞繫.以間接免疫熒光及western blot鑒定SU的錶達狀況,併運用共聚焦顯微鏡確認SU蛋白的亞細胞定位.結果錶明,重組蛋白SU在A549細胞中有效錶達,而且主要分佈于細胞質中.該細胞繫的建立為SU生物學功能的體外研究提供瞭平檯.
위연구면양폐선류병병독(JSRV)표면단백(SU)적치류궤제,본연구구건은정표체SU적양폐세포A549세포계.채용PCR방법종함su기인적pGEX-4T-1-SU중조질립중확증SU편마서렬,장기극륭지진핵표체재체pcDNA3.1(+)중,전염A549세포.통과G418사선,대전염양성세포진행순화,획득은정표체JSRV SU단백적A549세포계.이간접면역형광급western blot감정SU적표체상황,병운용공취초현미경학인SU단백적아세포정위.결과표명,중조단백SU재A549세포중유효표체,이차주요분포우세포질중.해세포계적건립위SU생물학공능적체외연구제공료평태.
