中华显微外科杂志
中華顯微外科雜誌
중화현미외과잡지
Chinese Journal of Microsurgery
2007年
5期
363-366,插5
,共5页
黄丹平%葛坚%高前应%卢蓉%郑健樑
黃丹平%葛堅%高前應%盧蓉%鄭健樑
황단평%갈견%고전응%로용%정건량
胚胎干细胞%羊膜%结膜上皮细胞%诱导分化
胚胎榦細胞%羊膜%結膜上皮細胞%誘導分化
배태간세포%양막%결막상피세포%유도분화
目的 观察小鼠胚胎干细胞在保存人羊膜及兔眼表结膜基质上分化的情况.方法 36只新西兰兔随机分为3组,每组12只.A组:将表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因的小鼠ES-GFP细胞用5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)标记后行实验兔结膜下移植;B组:将小鼠ES-GFP细胞接种到人羊膜上共培养4 d,用BrdU标记后移植到实验兔结膜缺损区;C组:采用保存羊膜移植到实验兔兔结膜缺损区.分别于移植后1、2、3、4,6和8周,摘取各组实验眼行荧光显微镜、组织学和免疫组织化学检查,荧光检测ES-GFP细胞在组织中的荧光表达,组织学检查移植到结膜基质的ES-GFP细胞的存活、形态变化以及移植局部的反应等情况;免疫组织化学检测移植到结膜基质的带有BrdU标记的ES-GFP细胞CK3/CK12和CK13的表达.结果 小鼠ES-GFP细胞接种到人羊膜后能在羊膜上贴附生长,与羊膜共培养4 d后部分ES-GFP细胞分化为多角形上皮样细胞,免疫组化显示β1整合素阳性.将负载有ES-GFP细胞的羊膜移植到兔结膜缺损区,术后荧光显微镜可在结膜上皮层检测到绿色荧光带,免疫组织化学检测结膜上皮层CK13表达阳性,CK3/CK12表达阴性,在重建的结膜上皮层可检测到BrdU核阳性细胞,未见异常增殖细胞.结论 采用保存人羊膜负载小鼠ES细胞行兔结膜移植,小鼠ES细胞能在兔结膜基质存活并增殖.
目的 觀察小鼠胚胎榦細胞在保存人羊膜及兔眼錶結膜基質上分化的情況.方法 36隻新西蘭兔隨機分為3組,每組12隻.A組:將錶達綠色熒光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因的小鼠ES-GFP細胞用5-溴脫氧尿嘧啶(BrdU)標記後行實驗兔結膜下移植;B組:將小鼠ES-GFP細胞接種到人羊膜上共培養4 d,用BrdU標記後移植到實驗兔結膜缺損區;C組:採用保存羊膜移植到實驗兔兔結膜缺損區.分彆于移植後1、2、3、4,6和8週,摘取各組實驗眼行熒光顯微鏡、組織學和免疫組織化學檢查,熒光檢測ES-GFP細胞在組織中的熒光錶達,組織學檢查移植到結膜基質的ES-GFP細胞的存活、形態變化以及移植跼部的反應等情況;免疫組織化學檢測移植到結膜基質的帶有BrdU標記的ES-GFP細胞CK3/CK12和CK13的錶達.結果 小鼠ES-GFP細胞接種到人羊膜後能在羊膜上貼附生長,與羊膜共培養4 d後部分ES-GFP細胞分化為多角形上皮樣細胞,免疫組化顯示β1整閤素暘性.將負載有ES-GFP細胞的羊膜移植到兔結膜缺損區,術後熒光顯微鏡可在結膜上皮層檢測到綠色熒光帶,免疫組織化學檢測結膜上皮層CK13錶達暘性,CK3/CK12錶達陰性,在重建的結膜上皮層可檢測到BrdU覈暘性細胞,未見異常增殖細胞.結論 採用保存人羊膜負載小鼠ES細胞行兔結膜移植,小鼠ES細胞能在兔結膜基質存活併增殖.
목적 관찰소서배태간세포재보존인양막급토안표결막기질상분화적정황.방법 36지신서란토수궤분위3조,매조12지.A조:장표체록색형광단백(green fluorescent protein,GFP)기인적소서ES-GFP세포용5-추탈양뇨밀정(BrdU)표기후행실험토결막하이식;B조:장소서ES-GFP세포접충도인양막상공배양4 d,용BrdU표기후이식도실험토결막결손구;C조:채용보존양막이식도실험토토결막결손구.분별우이식후1、2、3、4,6화8주,적취각조실험안행형광현미경、조직학화면역조직화학검사,형광검측ES-GFP세포재조직중적형광표체,조직학검사이식도결막기질적ES-GFP세포적존활、형태변화이급이식국부적반응등정황;면역조직화학검측이식도결막기질적대유BrdU표기적ES-GFP세포CK3/CK12화CK13적표체.결과 소서ES-GFP세포접충도인양막후능재양막상첩부생장,여양막공배양4 d후부분ES-GFP세포분화위다각형상피양세포,면역조화현시β1정합소양성.장부재유ES-GFP세포적양막이식도토결막결손구,술후형광현미경가재결막상피층검측도록색형광대,면역조직화학검측결막상피층CK13표체양성,CK3/CK12표체음성,재중건적결막상피층가검측도BrdU핵양성세포,미견이상증식세포.결론 채용보존인양막부재소서ES세포행토결막이식,소서ES세포능재토결막기질존활병증식.
