应用与环境生物学报
應用與環境生物學報
응용여배경생물학보
CHINESE JOURNAL OF APPLIED & ENVIRONMENTAL BIOLOGY
2005年
4期
399-403
,共5页
马沁沁%张金辉%陈荣军%邓光兵%余懋群
馬沁沁%張金輝%陳榮軍%鄧光兵%餘懋群
마심심%장금휘%진영군%산광병%여무군
绒毡层%启动子%Touchdown PCR%克隆%载体构建
絨氈層%啟動子%Touchdown PCR%剋隆%載體構建
융전층%계동자%Touchdown PCR%극륭%재체구건
从籼稻川75A (Oryza sativa L.)黄化苗叶片中直接提取基因组总DNA. 根据文献报道的水稻花药绒毡层特异启动子Osg6B序列设计引物,采用Touchdown PCR 技术获得水稻花药绒毡层特异表达的启动子Tsp1,将该片段克隆在载体pMD18-T Vector上转化到大肠杆菌JM109,并酶切和PCR验证. 序列分析发现,该片段与Osg6B启动子同源性为96%,且具有真核生物启动子的多种特征序列,表明启动子Tsp1为来源于籼稻川75A中的水稻花药绒毡层特异表达的启动子. 利用该启动子对本实验室保存的质粒pIB467和pIB009进行改造,构建了一个可产生新型雄性不育系的双元植物表达载体pJH401. 图7参13
從秈稻川75A (Oryza sativa L.)黃化苗葉片中直接提取基因組總DNA. 根據文獻報道的水稻花藥絨氈層特異啟動子Osg6B序列設計引物,採用Touchdown PCR 技術穫得水稻花藥絨氈層特異錶達的啟動子Tsp1,將該片段剋隆在載體pMD18-T Vector上轉化到大腸桿菌JM109,併酶切和PCR驗證. 序列分析髮現,該片段與Osg6B啟動子同源性為96%,且具有真覈生物啟動子的多種特徵序列,錶明啟動子Tsp1為來源于秈稻川75A中的水稻花藥絨氈層特異錶達的啟動子. 利用該啟動子對本實驗室保存的質粒pIB467和pIB009進行改造,構建瞭一箇可產生新型雄性不育繫的雙元植物錶達載體pJH401. 圖7參13
종선도천75A (Oryza sativa L.)황화묘협편중직접제취기인조총DNA. 근거문헌보도적수도화약융전층특이계동자Osg6B서렬설계인물,채용Touchdown PCR 기술획득수도화약융전층특이표체적계동자Tsp1,장해편단극륭재재체pMD18-T Vector상전화도대장간균JM109,병매절화PCR험증. 서렬분석발현,해편단여Osg6B계동자동원성위96%,차구유진핵생물계동자적다충특정서렬,표명계동자Tsp1위래원우선도천75A중적수도화약융전층특이표체적계동자. 이용해계동자대본실험실보존적질립pIB467화pIB009진행개조,구건료일개가산생신형웅성불육계적쌍원식물표체재체pJH401. 도7삼13
