生理学报
生理學報
생이학보
ACTA PHYSIOLOGICA SINICA
2006年
4期
370-376
,共7页
刘美玲%石心泉%周万灏%刘洪文%李东%贾孟春
劉美玲%石心泉%週萬灝%劉洪文%李東%賈孟春
류미령%석심천%주만호%류홍문%리동%가맹춘
骨髓基质细胞%成骨细胞%核心蛋白聚糖%基因
骨髓基質細胞%成骨細胞%覈心蛋白聚糖%基因
골수기질세포%성골세포%핵심단백취당%기인
为了探讨人骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)向成骨细胞分化过程中差异表达的基因,本实验采用体外培养人BMSCs,诱导向成骨细胞分化.分别选取培养12和21 d的细胞作为驱动方(driver)和实验方(tester),进行抑制消减杂交,构建cDNA消减文库,将挑选出的阳性克隆与GenBank人基因库中已公布的核酸序列进行同源性比较分析.结果表明,从培养21 d的BMSCs中,筛查出5个差异基因,与人基因库中已知基因的同源性分别达到90%以上.有兴趣的是,核心蛋白聚糖和Bax inhibitor 1在培养21 d的BMSCs中差异表达.RT-PCR检测显示,核心蛋白聚糖基因在培养21d的细胞中高表达,而在12 d的细胞中未检测到表达;Bax inhibitor 1基因在培养21 d细胞中的表达明显高于12 d的细胞.
為瞭探討人骨髓基質細胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)嚮成骨細胞分化過程中差異錶達的基因,本實驗採用體外培養人BMSCs,誘導嚮成骨細胞分化.分彆選取培養12和21 d的細胞作為驅動方(driver)和實驗方(tester),進行抑製消減雜交,構建cDNA消減文庫,將挑選齣的暘性剋隆與GenBank人基因庫中已公佈的覈痠序列進行同源性比較分析.結果錶明,從培養21 d的BMSCs中,篩查齣5箇差異基因,與人基因庫中已知基因的同源性分彆達到90%以上.有興趣的是,覈心蛋白聚糖和Bax inhibitor 1在培養21 d的BMSCs中差異錶達.RT-PCR檢測顯示,覈心蛋白聚糖基因在培養21d的細胞中高錶達,而在12 d的細胞中未檢測到錶達;Bax inhibitor 1基因在培養21 d細胞中的錶達明顯高于12 d的細胞.
위료탐토인골수기질세포(bone marrow stromal cells,BMSCs)향성골세포분화과정중차이표체적기인,본실험채용체외배양인BMSCs,유도향성골세포분화.분별선취배양12화21 d적세포작위구동방(driver)화실험방(tester),진행억제소감잡교,구건cDNA소감문고,장도선출적양성극륭여GenBank인기인고중이공포적핵산서렬진행동원성비교분석.결과표명,종배양21 d적BMSCs중,사사출5개차이기인,여인기인고중이지기인적동원성분별체도90%이상.유흥취적시,핵심단백취당화Bax inhibitor 1재배양21 d적BMSCs중차이표체.RT-PCR검측현시,핵심단백취당기인재배양21d적세포중고표체,이재12 d적세포중미검측도표체;Bax inhibitor 1기인재배양21 d세포중적표체명현고우12 d적세포.