湖南师范大学自然科学学报
湖南師範大學自然科學學報
호남사범대학자연과학학보
ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS NORMALIS HUNANENSIS
2008年
2期
96-99
,共4页
李红%贺志成%刘倩%周建林
李紅%賀誌成%劉倩%週建林
리홍%하지성%류천%주건림
TNFAIP1%四环素调控系统%诱导表达
TNFAIP1%四環素調控繫統%誘導錶達
TNFAIP1%사배소조공계통%유도표체
利用Tet-Off可诱导表达系统在HT1080细胞中建立可诱导表达TNFAIP1基因的稳定细胞系.首先将融合表达GFP的TNFAIP1片段克隆到反应质粒pTRE2hyg中,然后将该质粒转染到HT1080/Tet-off细胞中,使用潮霉素B筛选,挑取单克隆,得到稳定转染的细胞系,扩大培养后在荧光显微镜下观察克隆的诱导效率,得到了低背景,高效诱导表达GFP-TNFAIP1的稳定细胞系,便于研究TNFAIP1在细胞生长、细胞周期和细胞信号通路等方面的作用.
利用Tet-Off可誘導錶達繫統在HT1080細胞中建立可誘導錶達TNFAIP1基因的穩定細胞繫.首先將融閤錶達GFP的TNFAIP1片段剋隆到反應質粒pTRE2hyg中,然後將該質粒轉染到HT1080/Tet-off細胞中,使用潮黴素B篩選,挑取單剋隆,得到穩定轉染的細胞繫,擴大培養後在熒光顯微鏡下觀察剋隆的誘導效率,得到瞭低揹景,高效誘導錶達GFP-TNFAIP1的穩定細胞繫,便于研究TNFAIP1在細胞生長、細胞週期和細胞信號通路等方麵的作用.
이용Tet-Off가유도표체계통재HT1080세포중건립가유도표체TNFAIP1기인적은정세포계.수선장융합표체GFP적TNFAIP1편단극륭도반응질립pTRE2hyg중,연후장해질립전염도HT1080/Tet-off세포중,사용조매소B사선,도취단극륭,득도은정전염적세포계,확대배양후재형광현미경하관찰극륭적유도효솔,득도료저배경,고효유도표체GFP-TNFAIP1적은정세포계,편우연구TNFAIP1재세포생장、세포주기화세포신호통로등방면적작용.
