CAJ | 학술논문

背景:益气解毒中药复方在体外能通过下调端粒酶的活性抑制细胞生长和诱导细胞凋亡,还可能通过抑制细胞内重要的核转录因子、细胞分裂增殖、细胞周期、DNA修复和诱导细胞凋亡、促进坏死等信号通路,从而抑制细胞增殖和诱导细胞死亡.目的:实验拟观察益气解毒方对TgN(p53mt-LMP1)/HT转基因小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮细胞增殖及凋亡相关基因bax、bcl-2、增殖细胞核抗原和p53mt基因表达的影响.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-01/2007-12在湖南中医药大学中西医结合学院基础研究室和中医五官重点学科实验室完成.材料:G4代8月龄TgN(p53mt-LMP1)/HT转基因阳性小鼠和阴性小鼠各24只,体质量(25.44±2.3)kg,用于制备鼻咽和鼻腔癌前病变模型;益气解毒颗粒方药液为自制.方法:48只小鼠随机分为4组,转基因阳性中药组和转摹因阴性中药组小鼠灌胃益气解毒颗粒方药液,给药剂量为12.91 g/kd·d);转基因阳性生理盐水组和转基因阴性生理盐水组小鼠灌等体积生理盐水.主要观察指标:苏木精-伊红染色观察鼻腔和鼻咽黏膜病理组织学变化,免疫组织化学染色法检测其bax、bcl-2、增殖细胞核抗原和p53mt摹因表达水平.结果:纳入转基因阳性小鼠和阴性小鼠各24只,转基因阳性生理盐水组和转基因阴性生理盐水组于实验结束前各死亡1只,转基因阴性中药组死亡1只，转基因阳性中药组死亡2只小鼠，共43只小鼠进入绳索果分析.①转基因阴性生理盐水组、转基因阴性中药组小鼠的鼻腔/鼻咽黏膜组织均无明显病变；转基因阳性中药组有1只小鼠表现中度非典型性增生，转基因阳性生理盐水组有10只小鼠鼻腔和，或鼻咽黏膜上皮细胞呈现中度或中度以上非典型增生或灶性鳞状化生.转基因阴性生理盐水组、转基因阴性中药组、转基因阳性中药组和转基因阳性生理盐水组小鼠鼻腔或鼻咽黏膜上皮癌前病变率分别为0、0、10％和90.9％，差异具有显著性意义(P<0.01).②与转基因阳性生理盐水组相比.其他各组小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮细胞中p53mt、bcl-2和增殖细胞核抗原表达水平均下降(P<0.01)，bax表达水平显著增高，bcl-21bax比值降低(P<0.01).结论：益气解毒方中药可有效抑制或逆转TgN(p53mt-LMP1)HT阳性小鼠鼻腔或鼻咽黏膜上皮的癌前病变表型，其作用机制之一可能通过下调p53mt摹因和增殖细胞核抗原的表达，降低bcl-2／bax比值，使细胞增殖和凋亡速度达到平衡，进而促使鼻腔和鼻咽黏膜上皮细胞正常增长. 揹景:益氣解毒中藥複方在體外能通過下調耑粒酶的活性抑製細胞生長和誘導細胞凋亡,還可能通過抑製細胞內重要的覈轉錄因子、細胞分裂增殖、細胞週期、DNA脩複和誘導細胞凋亡、促進壞死等信號通路,從而抑製細胞增殖和誘導細胞死亡.目的:實驗擬觀察益氣解毒方對TgN(p53mt-LMP1)/HT轉基因小鼠鼻腔和鼻嚥黏膜上皮細胞增殖及凋亡相關基因bax、bcl-2、增殖細胞覈抗原和p53mt基因錶達的影響.設計、時間及地點:隨機對照動物實驗,于2006-01/2007-12在湖南中醫藥大學中西醫結閤學院基礎研究室和中醫五官重點學科實驗室完成.材料:G4代8月齡TgN(p53mt-LMP1)/HT轉基因暘性小鼠和陰性小鼠各24隻,體質量(25.44±2.3)kg,用于製備鼻嚥和鼻腔癌前病變模型;益氣解毒顆粒方藥液為自製.方法:48隻小鼠隨機分為4組,轉基因暘性中藥組和轉摹因陰性中藥組小鼠灌胃益氣解毒顆粒方藥液,給藥劑量為12.91 g/kd·d);轉基因暘性生理鹽水組和轉基因陰性生理鹽水組小鼠灌等體積生理鹽水.主要觀察指標:囌木精-伊紅染色觀察鼻腔和鼻嚥黏膜病理組織學變化,免疫組織化學染色法檢測其bax、bcl-2、增殖細胞覈抗原和p53mt摹因錶達水平.結果:納入轉基因暘性小鼠和陰性小鼠各24隻,轉基因暘性生理鹽水組和轉基因陰性生理鹽水組于實驗結束前各死亡1隻,轉基因陰性中藥組死亡1隻，轉基因暘性中藥組死亡2隻小鼠，共43隻小鼠進入繩索果分析.①轉基因陰性生理鹽水組、轉基因陰性中藥組小鼠的鼻腔/鼻嚥黏膜組織均無明顯病變；轉基因暘性中藥組有1隻小鼠錶現中度非典型性增生，轉基因暘性生理鹽水組有10隻小鼠鼻腔和，或鼻嚥黏膜上皮細胞呈現中度或中度以上非典型增生或竈性鱗狀化生.轉基因陰性生理鹽水組、轉基因陰性中藥組、轉基因暘性中藥組和轉基因暘性生理鹽水組小鼠鼻腔或鼻嚥黏膜上皮癌前病變率分彆為0、0、10％和90.9％，差異具有顯著性意義(P<0.01).②與轉基因暘性生理鹽水組相比.其他各組小鼠鼻腔和鼻嚥黏膜上皮細胞中p53mt、bcl-2和增殖細胞覈抗原錶達水平均下降(P<0.01)，bax錶達水平顯著增高，bcl-21bax比值降低(P<0.01).結論：益氣解毒方中藥可有效抑製或逆轉TgN(p53mt-LMP1)HT暘性小鼠鼻腔或鼻嚥黏膜上皮的癌前病變錶型，其作用機製之一可能通過下調p53mt摹因和增殖細胞覈抗原的錶達，降低bcl-2／bax比值，使細胞增殖和凋亡速度達到平衡，進而促使鼻腔和鼻嚥黏膜上皮細胞正常增長.
배경:익기해독중약복방재체외능통과하조단립매적활성억제세포생장화유도세포조망,환가능통과억제세포내중요적핵전록인자、세포분렬증식、세포주기、DNA수복화유도세포조망、촉진배사등신호통로,종이억제세포증식화유도세포사망.목적:실험의관찰익기해독방대TgN(p53mt-LMP1)/HT전기인소서비강화비인점막상피세포증식급조망상관기인bax、bcl-2、증식세포핵항원화p53mt기인표체적영향.설계、시간급지점:수궤대조동물실험,우2006-01/2007-12재호남중의약대학중서의결합학원기출연구실화중의오관중점학과실험실완성.재료:G4대8월령TgN(p53mt-LMP1)/HT전기인양성소서화음성소서각24지,체질량(25.44±2.3)kg,용우제비비인화비강암전병변모형;익기해독과립방약액위자제.방법:48지소서수궤분위4조,전기인양성중약조화전모인음성중약조소서관위익기해독과립방약액,급약제량위12.91 g/kd·d);전기인양성생리염수조화전기인음성생리염수조소서관등체적생리염수.주요관찰지표:소목정-이홍염색관찰비강화비인점막병리조직학변화,면역조직화학염색법검측기bax、bcl-2、증식세포핵항원화p53mt모인표체수평.결과:납입전기인양성소서화음성소서각24지,전기인양성생리염수조화전기인음성생리염수조우실험결속전각사망1지,전기인음성중약조사망1지，전기인양성중약조사망2지소서，공43지소서진입승색과분석.①전기인음성생리염수조、전기인음성중약조소서적비강/비인점막조직균무명현병변；전기인양성중약조유1지소서표현중도비전형성증생，전기인양성생리염수조유10지소서비강화，혹비인점막상피세포정현중도혹중도이상비전형증생혹조성린상화생.전기인음성생리염수조、전기인음성중약조、전기인양성중약조화전기인양성생리염수조소서비강혹비인점막상피암전병변솔분별위0、0、10％화90.9％，차이구유현저성의의(P<0.01).②여전기인양성생리염수조상비.기타각조소서비강화비인점막상피세포중p53mt、bcl-2화증식세포핵항원표체수평균하강(P<0.01)，bax표체수평현저증고，bcl-21bax비치강저(P<0.01).결론：익기해독방중약가유효억제혹역전TgN(p53mt-LMP1)HT양성소서비강혹비인점막상피적암전병변표형，기작용궤제지일가능통과하조p53mt모인화증식세포핵항원적표체，강저bcl-2／bax비치，사세포증식화조망속도체도평형，진이촉사비강화비인점막상피세포정상증장.